Ph D Une Hydrolyse Enzymatique

Laboratoire 3 Étude des effets des enzymes digestives Ce laboratoire comporte 4 expériences : Expérience 1 : effet de l'amylase salivaire sur un sucre lourd Expérience 2 : effet du pH sur l’activité enzymatique Expérience 3 : effet de la lipase pancréatique sur les graisses Expérience 4 : effet d'une enzyme protéolytique sur les protéines Tests préliminaires Test préliminaire A : Bâtonnet «clini-test» pour la détection du glucose Les bâtonnets «clini-test» sont utilisés

Enzymologie I – Catalyse enzymatique 1 - Définition de la catalyse Afin de permettre la réalisation de certaines réactions chimiques, il faut parfois ajouter un composé qui, sans prendre part à la réaction, va faciliter le déroulement des processus chimiques : ce composé facilitateur est un catalyseur chimique. Définition d’un catalyseur selon Ostwal (1902) : « Substance accélérant la vitesse d’une réaction chimique sans apparaître dans les produits finaux.» Modèle de la serrure et de la clé pour

réaction (ex : hydrolyse). III – Les conditions d’actions des enzymes - Pour chaque enzyme, il existe une température optimale pour que la vitesse de réaction soit maximale. Au dessus ou en dessous de cette température, l’activité de l’enzyme décroît. Chez l’homme, 37° température optimale. - Pour chaque enzyme, il existe un pH optimal. Mais le pH est différent d’une enzyme à une autre. Au dessus ou en dessous de ce pH, l’activité enzymatique décroît. Lorsque le pH ou la température

pour catalyser une nouvelle réaction, ce qui explique qu’elle soit active à faible concentration. 2. Comment nomme-t-on les réactifs d’une réaction enzymatique ? Les substrats. 3. Comment nomme-t-on les composés résultant de la réaction enzymatique ? Les produits. 4. Comment nomme-t-on l’action de l’enzyme ? La catalyse enzymatique. 5. Titrez et légendez la figure suivante. Puis, décrivez la structure n°4. Enfin, décrivez les différentes étapes de la réaction illustrée.

l’influence d’un effecteur chimique (ONPG) : 6 d. Détermination de la vitesse de réaction et des paramètres cinétiques vis-à-vis du lactose de l’enzyme immobilisée et étude de l’influence d’un effecteur chimique (ONPG) : 7 e. Etude de l’influence du pH et du méthyl- β-galactopyranoside sur les enzymes solubles et immobilisées : 7 f. Etude de l’influence de la température et du galactose sur les enzymes solubles et immobilisées : 7 5) Résultats : 8 a. Détermination de coefficient d’extinction

 libre  standard  de  la  réaction  catalysée  par  la  phosphoglucomutase   D-­‐Glc  1P    ⇔    D-­‐Glc  6P   -­‐1 considérée  de  gauche  à  droite,  est  de  –  1.74  kcal.mol ,  à  25°C,  pH  =  7.   Dans  quel  sens  la  réaction  tend-­‐elle  à  se  faire  spontanément,  dans  les  3  cas  suivants,  pour  lesquels  on  connaît   les  molarités  du  Glc  1P  et  du  Glc  6P

sans oublier les bactériophages qui jouent un rôle dans la régulation des populations.Compte tenu de la diversité microbienne du lait cru et des paramètres technologiques qui change dans chaque ferme, la sélection microbienne et le potentiel enzymatique du jeune fromage, va induire des différences entre les fermes et ceci pour une même technologie.Définition : dans la littérature il faut lire les micro-organismes, comme ceciGenre, espèce, toute espècs (spp), sous espèce, biovar, biotype, lysotype

_________________________________________________________________ 1 PPrroottooccoolleess ddee TTrraavvaauuxx PPrraattiiqquueess TP 1. Séparation de l'alanine et de l'arginine sur résine échangeuse d'ions TP 2. Spécificité des actions enzymatiques : les glycosidases TP 3. Extraction de l'albumine d'un sérum par chromatographie d'affinité TP 4. Structure d’un dipeptide et mise en évidence d'une réaction de transamination par la glutamate oxaloacétate transaminase TP 5. Etude cinétique

dépendent de son patrimoine génétique, les enzymes sont le plus souvent des protéines Un changement de pH peut influencer la structure de l'enzyme et ou de son substrat Le substrat peut posséder des fonctions acides bases Les protéines sont des polymères d'acides amines F La structure tridimensionnelle (3D) des protéines étant basée sur un cœur hydrophobe, elle est insensible aux variations de pH La liaison de faible énergie qui relie entre eux les acides aminés constituant une séquence polypeptidique

commission Pr A. EL KANOUNI…………………………………………………………………………………Encadrant Pr J. MOUSLIM……………………………………………………………………………………….Examinateur Pr I. ZERDANI…………………………………………………………………………………………Examinatrice Année Universitaire 2009 – 2010 ✓ Résumé : Une hydrolyse acide sulfurique diluée, de la bagasse de betterave sucrière, a été réalisée par autoclavage à différentes pressions et à différents temps d’hydrolyse. Les proportions d’essais sont de 1/10 (w/v). Les résultats obtenus montrent qu’une concentration