Dosage Oxydoreduction

allons utiliser dans ce TP la phosphatase alcaline de veau. C’est une enzyme à 2 substrats qui à un pH optimal alcalin et qui hydrolyse les monoesters phosphoriques selon la réaction suivante : R-O-PO32- + H2O  R-OH + HPO42- Dosage spectrophotométrique Un dosage spectrophotométrique permet de mesurer l’absorbance d’une substance colorée au cours du temps car elle absorbe à une longueur d‘onde donnée. Pour notre TP, le spectrophotomètre est relié à un ordinateur pour permettre de visualiser

TITRE : APPLICATION AUX DOSAGES ACIDIMETRIQUES But de la volumétrie : Cette application relève de La titrimétrie ou titrage est une technique de dosage visant la détermination de la concentration d'une espèce chimique en solution (ou titre d'une solution). Le principe : Afin de résoudre le problème ici posé, nous associerons théorie et pratique en nous fondant sur les équations que sont : HCO3-+ H3O+ H2O+ CO2, H2O celle-ci correspondant aux ions hydrogénocarbonate

concentration c2" = = 0,0441 mol.L–1. pHéq2 = = 7 + = 8,72. Détermination expérimentale du pKA de CH3COOH : À la demi-équivalence du deuxième dosage, c’est à dire pour V = = 15 mL, on obtient sur le graphe une valeur du pH voisine de 4,8 qui est la valeur du pKA de l’acide faible. En effet, en faisant le bilan de la réaction du 2ème dosage à V = 15 mL, on obtient : pH à V = 25 mL : On obtient un mélange de base faible CH3COO− et de base forte OH−. Celle-ci impose son pH : pH = 14 +

Dosage d’un mélange de deux sucres a) BUT Nous sommes en présence d’une solution sucrée de concentration connue. Cette solution sucrée est le résultat d’un mélange de deux sucres : le xylose et le fructose. Nous allons alors essayer de connaître la concentration de chacun des sucres dans la solution sachant que nous avons un aldose et un cétose. Pour cela nous allons utiliser deux méthodes afin de pouvoir comparer les résultats et de s’assurer de la justesse de nos observations :

présent des les parois bactériennes. Les parois bactériennes absorbent à 450nm et leur lyse entraîne une diminution de l’absorbance ce qui permet de détermine l’activité catalytique de l’enzyme. La troisième étape consiste à doser les protéines. Ce dosage est réalisé par la méthode colorimétrique de folin-lowry. Elles est basée sur deux réactions colorées:la réaction du biuret et la réduction de la tyrosine et du tryptophane par le réactif de folin-ciocalteu. Le maximum d’absorption du complexe coloré

TRAVAUX PRATIQUES DE BIOCHIMIE : DOSAGE D’UN MELANGE DE DEUX SUCRES I. BUT Nous voulons déterminer la concentration et le pourcentage massique de deux sucres : un aldose et un cétose : le xylose et le fructose. Formule du xylose (aldose) Formule du fructose (cétose) Ces deux sucres sont présents dans une solution donnée. On procède à deux types de dosage : - le dosage du xylose (aldose) avec du diiode en milieu alcalin en

de concentration de ce sel, donc elle restera en suspension dans la solution1. Malgré tout, il reste que le sulfite de sodium reste le meilleur sel pour faire précipiter les protéines du sang animal1.Le pourcentage de protéines précipitées via le dosage de protéines avec la méthode de Lowry reflète sur ce qu’on peut voir avec le gel d’agarose. Pour l’E2, on peut constater l’anomalie du fait que le % de protéines précipitées est à 0% et aussi sur le gel où il n’y a pas de protéine visible. Comme

menthe un enfant de 35 kg peut-il ingérer par jour ? Soit V2 ce volume. Soit m la masse que l’enfant peut ingérer par jour. t2’ = m/V2 Par suite : V2 = m/t2’ Application numérique : V2 = (2,50x35)/65 V2 = 1,35 L Exercice n°2 DOSAGE D’UN VIN BLANC ( points) Pour éviter l’oxydation d’un vin, les viticulteurs ajoutent du dioxyde de soufre (SO2) au moût de raisin ou au vin. La teneur en dioxyde de soufre est limitée par la loi à 210 mg.L-1. Pour vérifier la conformité de la

contenue dans un extrait tissulaire Fraction non retenue Fraction de lavage Fraction E1 Fraction E2 Fraction E3 2°) Mesure de l’activité enzymatique de la LDH dans les différentes fractions (annexe 5) 3°) Dosage des protéines par la méthode de Bradford (annexe 1) =>Calcule d’une pente voir (annexe 5) : Ordonné : - P1 Abscisse :

récupérer le lysozyme ? Justifier votre réponse. s 1/6 Compte rendu du TP n°l BL01 Purification du lysozyme de blanc d'ceuf II) Dans les autres fractions (nommez les) que doit-on s'attendre à récupérer ? fia n - III) Quel est le principe du dosage de l'activité enzymatique utilisé durant cette séance deTP? IV) Mesure de l'activité enzymatique : a) Remplissez le tableau suivant avec vos mesures expérimentales pour les fractions FO, FI, F2, El et E2. Puis calculez le nombre d'unités enzymatiques