Dosage Par Spectro Uv Visible

Spectrophotométrie UV-Visible Domaine UV-Visible Domaine du spectre ultraviolet utilisé en analyse : 190-400 nm. Domaine du spectre visible : 400-750 nm. Domaines complémentaires. X.Bataille, ENCPB, 2002 Processus d’absorption Spectroscopie d’absorption : fondamental → excité X.Bataille, ENCPB, 2002 Structures vibrationnelles Présentes sur certains spectres (aromatiques) X.Bataille, ENCPB, 2002 Phénomènes d’émission Fluorescence Phosphorescence Phénomènes

Chapitre 3 : les techniques physico-chimiques d’analyse et de caractérisation Le choix : - des caractéristiques de l’analyte • Pure ? • A séparer des autres composés ? • En concentration suffisante ? • A récupérer après dosage ? • Quel volume disponible ? - des caractéristiques de la méthode : Précision, sensibilité, coût, rapidité… 1. La pH metrie 1 Définition Le pH est la mesure de l’acidité ou la basicité d’une solution. pH : potentiel hydrogène = -log [H3O+] En réalité

Chapitre 3 Dosage d’une espèce chimique en solution 3.1 Dosage par étalonnage . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 26 3.1.1 Spectrophotométrie UV-visible . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 26 3.1.2 Loi de Beer-Lambert . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27 3.1.3 Dosage par étalonnage . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 28 3.1.4 Remarque sur le suivi d’une transformation chimique . . . . . . . . .

matière : Analyse spectrale Type de ressources : protocole expérimental, TICE. Notions et contenus : Spectres UV-visible (lien entre couleur perçue et longueur d’onde au maximum d’absorption de substances organiques ou inorganiques). Compétences travaillées ou évaluées : Mettre en œuvre un protocole expérimental pour caractériser une espèce colorée. Exploiter des spectres UV-visible. Elaboration d’un protocole de résolution (protocole expérimental, choix de matériel de dilution). Savoir-faire

Fractionnement cellulaire, matériel biologique et dosage protéique des fractions 10 Cinétique enzymatique 11 Gel d’électrophorèse 14 Discussion 16 CONCLUSION 20 Références 21 Annexe 1 : CINÉTIQUE ENZYMATIQUE : EXEMPLE DE CALCUL POUR L’EXTRAPOLATION POUR LES DONNÉES DE vmax, km et ki AVEC LE GRAPHIQUE 2 (P.12) 18 Table des tableaux et des figures Tableau I : Dosage des échantillons de fractions cellulaire obtenus avec un spectrophotomètre de type Spectro thermo Scientifique, modèle Spectronic 2000

simple :Tube en verre avec plaque en verre fritté à la base ou tampon de coton § substances descendent le long de la colonne selon affinité § recueil de l’éluat par petites fractions § Mais : ü peu sensible ü long ü peu d’analyse de trace ou dosage o La chromatographie haute performance (HPLC) § Granulométrie entre 2-10 µm § Meilleure efficacité et résolution § Très utilisé +++ Ø Structure générale d’un HPLC : A : réservoir de PM B : Vanne électro magnétique de mélange des PM C

bouton-poussoir jusqu'à la position de repos (A, relâché). Ejectez le cône dans une poubelle. Rappels à propos des dosages spectrophotométriques : Un grand nombre de molécules d'intérêt biologique absorbent la lumière ultraviolette ou visible. D'autres molécules n'absorbent pas mais peuvent donner avec un réactif approprié un composé possédant un spectre d'absorbance, permettant ainsi un dosage spectrophotométrique. 1. Loi de Beer-Lambert Soit un faisceau lumineux monochromatique de longueur d'onde

beaucoup plus grande que les catalyseurs chimiques 1) Vitesse de réaction Variation de concentration par unité de temps  M.min-1 ou M.s-1 Dosage difficile (mesure de la concentration) parce que les enzymes agissent à des concentrations très faibles, et sont de plus mélangées à d’autres protéines. (Rappel : on dose les protéines en spectro d’absorbance avec les UV : les AA aromatiques absorbent dans l’UV grâce à leurs doubles liaisons conjuguées). En revanche, on peut mesurer la capacité à catalyser

+ 1/2 [CO32-] | La réaction du dosage est : CO32- + H+ HCO3¯ Tandis que le titre alcalimétrique complet (TAC) correspond à la neutralisation de la totalité des ions hydroxydes, carbonates et hydrogénocarbonates par un acide fort (HCl). |TA = [OH¯] + [CO32-] + [HCO3-] | La réaction du dosage est : HCO3¯ + H+

TP de Chimie 2014-2015 Classe de Terminale S2 TP de terminales S – Chimie – TP Page 2 TP Chimie n°2 : Suivi spectrophotométrique d'une réaction vendredi 07 novembre 2014 Objectif : Tracer la droite d’étalonnage A=f(c) Utiliser la spectro UV-visible pour suivre physiquement une réaction chimique. Déterminer le temps de demi-réaction. Pour ce faire nous avons à notre disposition :  Une solution de permanganate de potassium (MnO4 - )  Une