Substrat enzymatique

déterminer les paramètres cinétiques d’une enzyme en étudiant l’influence de la concentration en substrat et celle de la présence d’un inhibiteur dans le milieu réactionnel. On va mesurer l’activité de l’enzyme en mesurant par spectrophotométrie l’apparition du produit de la réaction qui sera coloré. PRINCIPE Nous allons utiliser dans ce TP la phosphatase alcaline de veau. C’est une enzyme à 2 substrats qui à un pH optimal alcalin et qui hydrolyse les monoesters phosphoriques selon la réaction

MATERIEL ET METHODES Matériel : Glace pillée Pilon Centrifugeuse Réactifs et produit : Tampon Acétate de Na avec un pH 4.7 constant pendant toute l'expérience Ethanol L’enzyme amylase extraite de flocons de blé et de salive Le substrat est une solution d’amidon Indicateur coloré : Di-Nitro-Salicylate (DNS), le DNS jaune est réduit en DNS rouge orangé On peut donc suivre l'apparition du DNS au cours de la réaction en enregistrant l'absorbance du mélange réactionnel en fonction

CHAPITRE 5 • Cinétique enzymatique Relations entre la vitesse de réaction et la concentration du substrat ou de l’enzyme Théorie du complexe stéréospécifique et propriétés cinétiques des enzymes Équation de Michaelis-Menten Détermination expérimentale des valeurs de Vmax et de KM Signification physique de KM Signification physique de la constante catalytique Kcat Le critère Kcat/KM mesure la spécificité et l’efficacité des enzymes Réactions mettant en présence plusieurs substrats Effet de la température

ENZYME – SUBSTRAT D'après Jacques Barrère, Lycée Paul-Louis Courier, Tours On sait que : • Les enzymes sont des catalyseurs d'une très grande efficacité. • Au cours d’une réaction enzymatique, le substrat se transforme progressivement (phénomène progressif nécessitant 3 à 5 minutes) en présence de l’enzyme qui reste inchangée. • Il y a spécificité entre enzyme et substrat. Il y a spécificité de la réaction catalysée par une enzyme donnée. • Plus il y a de substrat disponible

l’influence de la concentration d’enzyme et de substrat sur la cinétique enzymatique de la Trypsine. II.PRINCIPE : La trypsine est une enzyme digestive du suc pancréatique qui a pour but de digérer les protéines. C’est une endonucléase qui hydrolyse les liaisons peptidiques dans lesquelles un acide aminé basique (lysine, arginine) engage sa fonction acide. Son activité enzymatique et son mécanisme d’action peuvent être étudiés à l’aide des substrats synthétiques comme le benzyloxycarbonylarginyl-para-nitroanilide

1 STL – CBSV    Thème 2 : Nourrir les cellules  avril 2015  Chapitre 12 : les phénomènes mécaniques et biochimiques de la digestion Etude de la spécificité des enzymes de la digestion Objectifs : o Suivre une réaction enzymatique au cours du temps o Mettre en évidence l’action d’une enzyme o Mettre en évidence la spécificité des enzymes, o Identifier le groupe caractéristique des espèces chimiques impliquées dans la réaction d’hydrolyse de l’amidon Activité 1 : Etude de la structure de quelques

vue qu’un déficit enzymatique peut avoir de grandes conséquences. Ex Phénylcétonurie (PAH) ou plus simplement les groupes sanguins. Chaque enzyme a un rôle bien précis et chaque cellule possède un équipement enzymatique qui lui est propre. Cet équipement doit permettre de réaliser toute les réactions nécessaires à sont métabolisme mais aussi à sa fonction. Toute les cellules possèdent des enzymes actives dans leur métabolisme, elles auront donc un équipement enzymatique commun seulement en

pH et en milieu de force ionique généralement faible. II°) La réaction enzymatique: Ces réactions ne peuvent se produire qu'en présence de catalyseurs biologiques, les enzymes. Un catalyseur est une substance qui accélère la vitesse d'une réaction chimique mais qui n'est ni consommée ni transformée par la réaction. Pour réaliser cet exploit, les enzymes se lient aux molécules sur lesquelles elles agissent (les substrats) et les maintiennent dans la bonne position pour que l'interaction chimique

déterminer les paramètres cinétiques d’une enzyme, la phosphatase alcaline, en présence d’un ou de deux substrats. Pour cela nous avons, dans un premier temps, étudié l’activité de cette enzyme en présence de différentes concentrations d’un seul substrat. Ce qui nous a ensuite permis de l’étudier en présence de deux substrats. Principe Le p-nitrophényl phosphate (PNPP), qui sera notre premier substrat, est un composé incolore qui peut être hydrolysé pour libérer du p-nitrophénol (PNP). Ce produit est

Une seule molécule d’enzyme peut transformer un grand nombre de molécules de substrat en un temps très court. c – Les enzymes se retrouvent intactes à la fin de la réaction 2 – La double spécificité des enzymes a – Spécificité de substrat. On appelle substrat la molécule sur laquelle agit l’enzyme. Une enzyme donnée n’agit que sur un substrat spécifique. Le nom de l’enzyme indique la nature du substrat sur lequel elle agit. Exemples : la maltase transforme le maltose