Purification Lysozyme

souches. Ces bactéries étant administrées par voie orale, il est nécessaire qu’elles franchisent les obstacles majeurs du transit digestif : elles doivent donc résister aux enzymes présentes dans la cavité buccale dont la principale enzyme est le lysozyme, au pH acide de l’estomac. Cette acidité est due à la présence de fortes concentrations d’acide chlorhydrique, aux sucs pancréatiques et aux concentrations de bile et de mucus présentes dans l’intestin grêle. Certaines bactéries sont détruites dès

structure du mutant cggR (GTD030) par Southern Blot. p. 126 Figure 41 : Test in vitro par titration en retard de migration électrophorétique du rôle de la série conservée de Thymines sur l’interaction CggR/ADN. p. 127 Figure 42 : Surproduction et purification de His6-CggR. p. 128 Figure 43 : Détermination des oligomères possibles de CggR par pontage chimique au glutaraldéhyde. p. 128 Figure 44 : Test de l’effet de différents métabolites de la glycolyse sur l’interaction CggR/ADN par mesure de variation

.............. 119 II.5 L’analyse des produits PCR. .................................................................................. 120 II.5.1 La récupération des bandes d’ADN après l’électrophorèse. .......................... 120 II.5.2 La purification et le séquençage de l’ADN. ................................................... 121 II.5.3 L’alignement et analyse bioinformatique des séquences d’ADN. ................. 122 III L’IDENTIFICATION DES ESPECES. .................................

hybride et le cultiver indéfiniment: hybridome. Chaque hybridome sécrète un anticorps monoclonal de spécificité très étroite. Ces réactifs ont permis la localisation des protéines dans les tissus (immuno-histochimie ou immuno-fluorescence), la purification des protéines par chromatographie d’affinité ou la mise en évidence de l’interaction entre les protéines (immuno-précipitation). Certains anticorps monoclonaux humanisés (site de reconnaissance d’origine murine + reste de l’anticorps d’origine

dans les organes profonds constituant habituellement un milieu stérile (poumon, appareil urinaire, système nerveux central, etc…). La réponse inflammatoire comporte d’abord, la production des composés chimiques solubles, toxiques pour les germes (lysozymes, cytokines, interféron, complément et protéines de phase aiguë). Puis, les cellules phagocytaires interviennent (polynucléaires neutrophiles, exerçant un rôle central dans la défense contre l’infection fongique, macrophages). Les autres cellules

F 4 E 30 temps de rétention (minutes) 60 0 absorbance 280 nm 0 absorbance 280 nm 3 30 G 30 temps de rétention (minutes) 60 figure 24 . Séparations de protéines par échange de cations. A = chymotrypsinogène A, B = cytochrome C, C = lysozyme. 1 : échangeur à bras mobiles sur une phase de type gel porteuse de groupements carboxyles (colonne de 15 cm x 0,5 cm). 2 : échangeur sulfoné tentaculaire dp = 5 µm, colonne de 5 cm x 0,5 cm, élution par gradient (dihydrogénophosphate de sodium

, flottation f., ~ process, procédé de flottation floater n. (instr.), flotteur m. floating adj., flottant, sans frottement, ~ point (math.), virgule flottante, ~ voltage (électr.), tension flottante, ~ zone (chim.), zone flottante (méthode de purification) floatplane n. (aéro.), hydravion m. floaty adj., flottant flocculate (to) v. i., floculer flocculation n. (chim.), floculation f. floccule n. (astro., chim.), flocon m. flocculent adj., en flocons, floconneux flocculus = floccule floccus = floccule

, flottation f., ~ process, procédé de flottation floater n. (instr.), flotteur m. floating adj., flottant, sans frottement, ~ point (math.), virgule flottante, ~ voltage (électr.), tension flottante, ~ zone (chim.), zone flottante (méthode de purification) floatplane n. (aéro.), hydravion m. floaty adj., flottant flocculate (to) v. i., floculer flocculation n. (chim.), floculation f. floccule n. (astro., chim.), flocon m. flocculent adj., en flocons, floconneux flocculus = floccule floccus = floccule

rosé (oeno 22/2003, Oeno 12/2007)...... MA-F-AS315-11-ANCYAN Matières protéiques d’origine végétale (oeno 24/2004) ......... MA-F-AS315-12-PROVEG Polychlorophénols et polychloroanisoles (oeno 8/2006)........ MA-F-AS315-13-PCAPCP Détermination du lysozyme par HPLC (oeno 8/2007............. MA-F-AS315-14-LYSOZY Détermination du 3-Methoxypropane-1,2-diols et des glycérols cycliques (oeno 11/2007)............................ MA-F-AS315-15-GLYCYC SECTION 3.2 – COMPOSÉS NON ORGANIQUES SECTION 3.2.1 –

détergents, tel que le sodium dodécyl sulfate (SDS). En s’insérant dans les membranes, il déstabilise la bicouche lipidique et solubilise les protéines membranaires. Dans le cas des cellules bactériennes, l’action des détergents est facilitée par ajout du lysozyme, enzyme dégradant la paroi. Les protéines associées à l’ADN sont alors dissociées par ajout de protéinase. L’ADN est extrait par un mélange de solvants, phénol/chloroforme/alcool isoamylique. Après centrifugation, les lipides se retrouvent dans la