Purification Lysozyme

PURIFICATION DU LYSOZYME BUT Le but de ce travail pratique est de qualifier et de quantifier la protéine majoritaire dans le blanc d'œuf : le lysozyme. Pour cela, il est tout d'abord nécessaire de la purifier à l'aide d'une chromatographie échangeuse d'ions. Ainsi, on pourra mesurer l'activité enzymatique et doser les protéines présentes. PRINCIPE Chromatographie échangeuse d'ions La chromatographie est une méthode d'analyse physico-chimique de séparation. Les constituants d'un

TP n°1 : Purification du lysozyme But : le but de ce TP est de purifier le lysozyme à partir d'un blanc d'œuf à Principe : Afin de purifier le lysozyme, on réalise une chromatographie d'échange d'ions, à partir de la propriété basique de la protéine, en utilisant une résine de carboxyméthyl cellulose. Après l'avoir purifié, on vérifie cette purification grâce à la propriété enzymatique du lysozyme. La chromatographie d'échange d'ions dépend de l'adsorption réversible de molécules chargées

Purification du lysozymeBut :Le but de ce TP est de purifier un lysozyme, qui est une enzyme présente dans le blanc d’œuf. Pour cela, nous allons, dans un premier temps, séparer les constituants de notre mélange grâce à une chromatographie échangeuse d’ions, puis nous allons doser l’activité enzymatique du lysozyme par dosage spectrophotométrique. Enfin, nous allons réaliser un dosage de protéine grâce au réactif de Bradford et une gamme étalon. Principe  :Chromatographie

TP LYSOZYME 1995Licence SVT parcours Biochimie Techniques préparatives et analytiques en biochimie TP Purification du lysozyme p1 ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------ PURIFICATION DU LYSOZYME Le lysozyme ou mucopolypeptide-N acétyl-muramylhydrolase est une enzyme hydrolysant les liaisons -1,4 entre l'acide N- acétylmuraminique et les résidus 2-acétamido-2

Les Glucides 1. DÉFINITION . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .1 1.1. 2. EXEMPLES ..............................................................................................................................2 LES OSES. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

Purification du lysozyme de blanc d'œuf Compte rendu du TP n°1 BL01 Séance du : OÂ/0^ //Q Binôme : Note : Observations : <& Récapitulez les objectifs de ce TP : ai I) Quel est le principe de la méthode de purification utilisée ? Dans quelles fractions doit-on s'attendre à récupérer le lysozyme ? Justifier votre réponse. s 1/6 Compte rendu du TP n°l BL01 Purification du lysozyme de blanc d'ceuf II) Dans les autres fractions (nommez les) que doit-on s'attendre à récupérer ? fia n -

/ 623 01 T D BO HMI L E C D BO O I G N R L P E IC I E I N E E IL GE E E A E C Home | News | Hacking | Sciences | Technology | Ti 92 | Programming | Free articles | Links | Webmaster PURIFICATION DU LYSOZYME DE BLANC D’OEUF PAR CHROMATOGRAPHIE D’ECHANGE D’IONS ET CONTROLE DE L’HOMOGENEITE DU LYSOZYME PAR ELECTROPHORESE SUR GEL DE POLYACRYLAMIDE EN PRESENCE DE SDS S K E L E T O N Ä Castry Glwadys and Delbé Lionel Ä Licence de biologie générale Université des Antilles Guyane faculté

I/ Introduction : Le lysozyme est une protéine globulaire de 129 AA. C'est une hydrolase acide secrétée par les granulocytes et les monocytes, appartenant à la famille des O-glycosyl hydrolases. Il est retrouvé chez les mammifères dans différentes secrétions (urine, salive, larme, lait), dans le sérum et dans le blanc d’œuf où il permet la nutrition du poussin en développement. Le lysozyme détruit la paroi bactérienne en catalysant l'hydrolyse des peptidoglycanes de cette dernière et constitue

Le lysozyme : purification et mise en évidence dans le blanc d’œuf A) Introduction : Le lysozyme est une protéine enzymatique découverte par FLEMMING en 1922 et est présente dans la plupart des liquides organiques (sérum, larmes, salive, etc…). Elle hydrolyse les liaisons glycosidiques β (1-4) entre l’acide N acétyl muraminique (NAM) et la N acétyl glucosamine (NAG), principaux constituants de la paroi bactérienne. Nous nous proposons de purifier du lysozyme présent dans le

Howard Walter Florey et Ernst Boris Chain en 1945).Au lieu de jeter l’ensemble, il fut attiré par un « détail » : la culture microbienne était morte là où la moisissure s’était développée ! Cela venait conforter sa première découverte de l’enzyme lysozyme, contenu dans la morve et les larmes : ces substance imprévues ont le pouvoir de tuer certains microbes.    [pic]                  [pic]          http://vimeo.com/39576176  Anecdote sur la découverte de la pénicilline.