Électrophorèse sur gel

1.2.Extraction des ARN 1.3.Extraction des 1.3.1. Rappel sur les plasmides plasmides 1.3.2. Purification par Lyse alcaline 1.3.3. Purification par Gradient de chlorure de césium 2.Séparation des acides nucléiques 2.1.Electrophorèse sur gel d’agarose 2.2.Electrophorèse sur gel de polyarylamide 3.Elaboration de Cartes de restrictions des 1.Purification des acides 1.1.Extraction nucléiques de =technique l’ADN permettant d'isoler l'ADN de cellules ou de tissus. L'ADN extrait  digestion, hybridation

Compte rendu du TP : électrophorèse de protéines, électrotransfert et immunorévélation But : L’objectif principal de ce TP est l’analyse par électrophorèse des protéines récupérées dans différentes fractions lors du TP consistant à extraire une molécule d’intérêt, le lysozyme, du reste des protéines d’un blanc d’œuf. Principes : - Electrophorèse : il s’agit d’une méthode qui permet de séparer et de caractériser des molécules. Elle se base sur le déplacement de molécules chargées sous l’effet d’un

Passage de l’électrophorèse sur gel à l’électrophorèse capillaire Dr Maurice Schmidt ADMED Analyses et diagnostics médicaux Neuchâtel-La Chaux-de-Fonds www.admed-ne.ch L’électrophorèse, une longue histoire de supports •  •  •  •  •  •  •  •  En veine liquide (Tiselius 1930) Papier filtre (membrane) Acétate de cellulose (membrane) Amidon (milieu gélifié) Agar-agar (milieu gélifié) Agarose (milieu gélifié) Polyacrylamide (gel) Capillaire de silice (veine liquide, ∅ < 100 µm, l: 8 cm) www

couleur contenant 10 μL de contrôles positifs (C) • 1 microtube marqué M contenant le Master Mix • 1 Micropipette de 20 μL• Embouts à micropipette de 20 μL• 1 Thermocycleur• 1 Chambre à électrophorèse• 1 Bloc d'alimentation• 1 erlenmeyer contenant de l’agarose liquide à 1 % et le marqueur fluorescent • 1 Lecteur de gel• Tampon d’électrophorèse TAE 0,25 X• 1 Bécher de 500 ml• 1 plat de plastique numéroté• Analyse génétique du chromosome 16S ( Biothechnologie) 12 mars 2022 15:09 CAHIER D'OBSERVATION

2014-2015 SEPARATION D’ADN PAR ELECTROPHORESE ANALYTIQUE ET PREPARATIVE OBJECTIF. Le but de ce TP est de purifier l’ADN plasmidique de pUC18-wzc ; d’en établir sa carte de restriction et de calculer le rendement de l’extraction du gène wzc. Pour cela, on fera agir différentes enzymes de restriction sur cet ADN plasmidique puis on réalisera une migration sur gel d’agarose. Pour finir, nous déterminerons la quantité de gène wzc que l’on aura extrait de ce gel. Principe. 1-Préparation de l’ADN

fragments d'ADN lambda clonés. RESULTATS ET DISCUSSION Analyse par électrophorèse de fragments d'ADN: Le TP de bio 57 est composé de deux analyses par électrophorèse sur gel d'agarose. L'électrophorèse en gel est utilisée pour séparer les macromolécules biologiques en fonction de leurs tailles et de leurs charges électriques. Le gel est constitué d'une matrice de polymère baignant dans un tampon conducteur. Sur ce gel les fragments de plus petites tailles se retrouvent le plus loin du puits

biologie moléculaire sont le plus souvent anticipées par des techniques de base. Les principales techniques utilisée couramment sont : Les extractions des acides nucléiques Les digestions enzymatiques par les enzymes de restriction Les électrophorèses sur gel Objectifs Au cours de la première séance de Travaux Pratique, nous avons effectué une mini extraction d’ADN plasmidique à partir d’une culture de bactéries d’Escherichia coli, en utilisant la technique de la lyse alcaline. Cette méthode

vecteur de clonage, ADN recombinant, plasmide, pBluescript, électrophorèse, transformation, LacZ, bactérie, phage lambda. Résumé : L’ADN peut faire l’objet de multiples travaux. Ici notre objectif est de cloner des morceaux de l’ADN du phage lambda dans le vecteur (plasmide) pBluescript. Pour se faire nous aurons recours à différentes techniques comme la digestion enzymatique (de l’ADN du phage ainsi que du plasmide), l’électrophorèse sur gel d’agarose, la transformation (par choc thermique) pour

différentes techniques biochimiques couramment employées en laboratoire. A savoir, le fractionnement des molécules au sulfate d’ammonium, suivi d’un dessalage par gel filtration avant de présenter l’étape de chromatographie par échange d’ions. Le projet de ces travaux étant finalement de déterminer les masses moléculaires grâce à une électrophorèse SDS PAGE réalisée en condition dénaturante ou non. II. MATÉRIEL ET MÉTHODES Avant toute description du protocole, il est important de souligner que

ELECTROPHORESE SUR GEL D'AGAROSE 1. RAPPELS THEORIQUES L'électrophorèse en gel d'agarose est une technique de base au laboratoire de biologie moléculaire. Elle est utilisée -soit à des fins analytiques: pour séparer et identifier des fragments d'ADN, pour déterminer leur taille, pour en estimer la quantité, -soit à des fins préparatives, pour purifier un fragment d'ADN de taille connue. La taille des fragments qu'il est possible de séparer est comprise entre 0,2 et 50 kb. Les fragments