Électrophorèse sur gel

glutamines en glutamate. (voir cours chapitre 8 dia 16 sur l’hydrolyse acide) 2. (3p) Expliquez, en une page maximum, les principes de séparation et les caractéristiques essentielles de la chromatographie par échange d’ions, de la filtration sur gel et de la technique SDS-PAGE. Vous n’avez pas vu je pense… a part le SDS-Page qui est dans le chapitre 8 dia 12 3. (4p) Décrivez, en une page maximum, la signification de l’équation de Michaelis-Menten et des paramètres kcat, Km et Vmax. Chapitre

les amorces et les dNTPs sont en quantité limitantes. La phase de plateau est obtenue lorsque tous les dNTPs est les amorces sont utilisées. Ce sont les deux phases de la PCR : la phase exponentielle et la phase de plateau. Electrophorèse de l’ADN. Elle se fait sur un gel d’acrylamide ou d’agarose. La migration est seulement influencée par la taille et on utilise cette technique pour de l’ADN double brin linéaire. Un ADN circulaire peut avoir de multiples formes, il peut être relâché ou avec

Hémopathies(leucemies), -Etude détaillée de frottis sanguin(peripheral blood film), -Laboratoire de transfusion sanguine(tests avant transfusion, avant la préscription des Rogam :Gamma-globulines pour les femmes Rhesus positif, prélèvement,… -Electrophorèse des protéines à partir de Gel d’amidon, 2°.LABORATOIRE DE SANTE PUBLIQUE : -Faire la sensibilisation contre la transmission des maladies contagieuses, -Faire le counseling des personnes voulant connaître leur statut sérologique(VIH-SIDA) , -Dépister le VIH

115 II.4 Les électrophorèses. ............................................................................................... 116 II.4.1 L’électrophorèse sur gel d’agarose. ............................................................... 116 II.4.2 L’électrophorèse sur gel d’acrylamide à gradient dénaturant (DGGE). ........ 118 II.4.3 L’électrophorèse en champ pulsé (ECP). ....................................................... 119 II.4.4 La comparaison des profils des électrophorèses. ...........

a) RT-PCR : Marqueur de taille entre 506 et 1018 pb. H2O comme marqueur négatif. Amplification du fragment de taille attendue du cDNA dans toutes les lignées cellulaires (LNCaP, DU-145, PC-3 et hPCE) : hybridation avec les primers spécifiques (électrophorèse, fragments amplifiés). Clonage et séquençage de PCR amplifiée : confirmation de la spécificité et correspondance avec la séquence publiée pour l’ARNm humain du canal IKCa1. b) WB : B-Actin : contrôle de la quantité d’équivalents ARN dans la RT-PCR

générés peuvent être séparés par électrophorèse sur gel et analysés. Cette technique peut être utilisée en identification pour comparer des ADN entre eux ou bien des ARN (ribotypage). FIGURE 7: SEQUENÇAGE ET PHYLOGENIE DU GENE DE L'ARNr Extraction de l’ADN étudié - Amplification du gène de l’ARN 16 S par PCR (amorces complémentaires des séquences de bordure) - Digestion par des enzymes de restriction - Séparation des produits de digestion par électrophorèse - Comparaison des profils entre

4)Analyse de l'ADN (séance 4) Lors de la quatrième séance nous avons analyser l'ADN identifié par la police. Séquence d'ADN:Détermination de la succession des nucléotides le composant. Électrophorèse sur gel:Permet de séparer des molécules en fonction de leur taille en les faisant migrer à travers un gel par application d'un champ électrique. Marqueurs génétiques:Le marqueur génétique est une séquence polymorphe d'ADN aisément détectable, utilisée en cartographie génétique pour « baliser

tableaux et des figures ii Résumé iii Introduction 1 Matériel et Méthodes 5 Résulats 9 Observations microscopiques des fractions 9 Fractionnement cellulaire, matériel biologique et dosage protéique des fractions 10 Cinétique enzymatique 11 Gel d’électrophorèse 14 Discussion 16 CONCLUSION 20 Références 21 Annexe 1 : CINÉTIQUE ENZYMATIQUE : EXEMPLE DE CALCUL POUR L’EXTRAPOLATION POUR LES DONNÉES DE vmax, km et ki AVEC LE GRAPHIQUE 2 (P.12) 18 Table des tableaux et des figures Tableau

PHAGES, COSMIDES, YAC, BAC, VIRUS 13 I- Les vecteurs en génie génétique : l'ADN plasmidique II- L'ADN phagique III. Cosmides, YAC et BAC 13 17 20 Chapitre III: ENZYME DE RESTRICTION, ÉLECTROPHORÈSE, CARTE DE RESTRICTION 24 I. Enzymes de restriction II. L’électrophorèse sur gel III. Les enzymes utiles en génie génétique: 24 30 31 CHAPITRE IV: CLONAGE ET ÉTUDE DE L’ADN CLONÉ. I - Le clonage II - Les banques génomiques III - Les banques de cADN IV - L’étude de l’ADN

résultats. Tracer les courbes de DO en fonction de la dilution pour chaque Ag testé. Licence SPS-L3S5 TP Exp. En Biologie. Responsable du TP: S. GONZALEZ-RIZZO Département de Biologie UFR SEN U.A. 6 Séance No.3 TECHNIQUE D’IMMUNODIFFUSION EN GEL Formation du complexe Antigène - Anticorps PRINCIPE Lorsque les molécules d'anticorps (Ac) rencontrent les molécules d’antigènes (Ag), la liaison antigène-anticorps conduit à la précipitation des complexes immuns dans la zone de rencontre si l’anticorps