Isoenzyme

diversité d'organismes, aussi bien végétaux qu'animaux. Elle catalyse la conversion réciproque de la pyruvate et de la lactate accompagnée de la conversion concomitante du NADH en NAD+ (et inversement). Ce tétramère est composé de 4 sous unité (isoenzyme) différents de par leurs constance cinétiques et leurs pH isoélectriques. Le but de ce TP est de purifier la LDH (ici de façon partielle) au moyen d'une chromatographie d'affinité en colonne. Le principe de la chromatographie d'affinité repose

potentialités embryogènes de différents types dc structures obtenues, des cals embryogènes et non embryogènes de patate douce ont étG caractérisés par l’analyse des isoenzymes et du comportement d’une kinase. la nucléoside diphosphate kinase, impliquée dans le phénomène de différenciation cellulaire. l L ‘analyse des isoenzymes Les isoenzymes sont facilement détectables et la variation de leurs activittis est souvent associée à des différences génétiques et des modifications morphogénétiques. alors

contiennent un grand nombre d’enzymes impliquées dans la transformation des médicaments, en particulier les réactions d’oxydoréduction, l’hydrolyse…. L’élément fondamental de ce système enzymatique est le cytochrome P450 comprenant de nombreuses isoenzymes. Schématiquement on distingue 2 phases de métabolisme selon les processus de transformation induits par ces enzymes : les réactions de phase I et celles de phase II. Pharmacocinétique et métabolisme des médicaments 4.1.2 Réactions de phase

complète comprend 4 chiffres : Enzyme = Hexokinase. E.C. : 2.7.1.1. ATP + D-Glucose → ADP + D-glucose-6-P 2 : transférase 7 : phosphotransférase 1 : groupement accepteur = OH 1 : D-glucose reçoit le phosphate. => Cela ne permet pas de différencier des isoenzymes (même réaction, gènes différents, propriétés différentes) donc ne renseigne pas sur les propriétés cinétiques de l’enzyme. e) Fonctionnement des enzymes : Principe Le substrat va venir se loger dans le site actif de l’enzyme. Le site actif

fonction de leur charge. Les protéines chargées négativement migrent vers l’anode (+) alors que les protéines chargées positivement migrent vers la cathode (-). Elles est réalisée à un pH basique de 8,8. Ce type d’électrophorèse permet de séparer les isoenzymes de la lactate déshydrogénase en fonction de leur pH isoélectrique La révélation de l’électrophorèse non dénaturante se fait par mise en évidence spécifique de l’activité de la lactate déshydrogénase par formation d’un précipité bleu : le milieu

dénaturantes, et lors de l’étude des gels après migration. Mots Clés : Électrophorèse, protéines, gels dénaturant/non-dénaturant, poids moléculaire, pHi. INTRODUCTION Lors de ce TP, nous allons étudier trois familles de protéines : les isoenzymes de la lactate déshydrogénase (iso LDH), l'albumine sérique de bovin (BSA), une protéine inconnue X. Cette étude se fera grâce à la réalisation d'électrophorèse sur gel d'acrylamides. En effet, cette méthode très utilisée en biochimie, va nous permettre

Nommer les 2 catégories de récepteurs et identifier le type de ligand qui se rattache à chacune d’entre elles. LES ENZYMES, LES GLUCIDES, LES LIPIDES, LES PROTEINES, LES OLIGOELEMENTS : 58. Définir les termes : enzyme, catalyseur, cofacteur, isoenzyme, métabolisme. 59. Nommer, donner la localisation tissulaire, et ce que marque les enzymes suivantes : ASAT, ALAT, PAL, GT, CPK, LDH, Lipase, Amylase. 60. Donner les rôles essentiels des glucides dans l’organisme. 61. Nommer le plus abondant des

- Principe - Appareillage - Principales applications en Biochimie Clinique. 1.3 Méthodes enzymatiques 1.3.1 Conditions standard pour la mesure d'une activité enzymatique -Utilisation des coenzymes à nicotinamide - Méthodes de déterminations des isoenzymes – Principales applications en Biochimie Clinique. 1.3.2 Conditions à respecter pour la détermination d’un substrat par une méthode enzymatique - Principales applications en Biochimie Clinique. Résidanat de Biologie Clinique 7 1.4 Méthodes

protéines est nécessaire et suffisante pour la formation de la structure tridimensionnelle active : la conformation est déterminée par la séquence des acides aminés. CHAPITRE 1 – CARACTÉRISTIQUES GÉNÉRALES DES ENZYMES 7 É É É Enzymologie D. LES ISOENZYMES D. Il s’agit d ‘enzymes ayant une activité catalytique donnée, qui existent sous des formes moléculaires multiples. Prenons l’exemple de la lactate déshydrogénase : CH3—CO—COOH + 2 H+ CH3—CHOH—COOH La LDH est un tétramère pouvant exister

de Mycophénolate. TAMOXIFENE ET INHIBITEURS DE L’ISOENZYME CYP 2D6 : PRUDENCE [8, 9, 10, 11] Le Tamoxifène, un anti-œstrogène, est le traitement hormonal de référence du cancer du sein. Il est largement transformé en métabolites actifs par des isoenzymes du cytochrome P450, notamment en endoxifène par l’isoenzyme CYP 2D6. Certains de ses métabolites, surtout l’endoxifène, ont un effet anti-œstrogène probablement plus marqué que celui du Tamoxifène lui-même. L’association du Tamoxifène à des médicaments