Électrophorèse sur gel

chromatographie d'absorption. a) La chromatographie d'exclusion d'ions (tamisage moléculaire ou perméation de gel). Pour pouvoir mettre en œuvre un tel type de technique, il faut que le soluté c'est à dire les molécules que l'ont veut séparer, est soit une taille, soit une forme, soit une masse molaire différente. On utilise comme phase stationnaire c'est à dire phase solide, des gels séphadex. Un gel séphadex est un sucre, formé de longue chaîne ==> polyoside, et on va fabriquer comme des microbilles

la nucléase micrococcale (qui clive l’ADN double-brin) clive l’ADN entre certaines des particules décrites ci-dessus; apparemment, les particules empêchent l’ADN qui leur est associé étroitement d’être digéré par la nucléase. L’électrophorèse sur gel indique que chaque particule de n-mère contient ~200 n pb d’ADN. 5. Des expériences de liaisons croisées indiquent que les histones H3 et H4 s’associent pour former le tétramère (H3)2(H4)2. Ces observations ont conduit Kornberg à proposer que les

une étape de dénaturation à 94°C pendant 5 s, une étape d’hybridation à 59°C pendant 10 s et une étape d’élongation à 72°C pendant 10 s, et enfin une étape d’élongation finale à 72°C pendant 5 mn. La révélation des produits d’amplification sur un gel d’agarose à 1,5 % a permis de déterminer le groupe phylogénétique en fonction de la présence ou non des 3 fragments d’ADN amplifiés. e- Typage moléculaire des souches Le typage moléculaire des souches d’E. coli a été réalisé par PCR en

liquide basse pression - Matériel pour chromatographie sur couche mince - Système de chromatographie en phase gazeuse - Systèmes de chromatographie liquide à haute performance (HPLC) et détecteurs associés - Appareillages et matériels pour électrophorèse sur gel - Modes opératoires - Temps imparti - Equipements de protection individuelle et collective - Valeurs et documents de référence - Echantillons biologiques - Kit chromatographique pour l’extraction d’acides nucléiques - Thermocycleur - Appareillage

macroscopiquement de manière diffuse (opacité par turbidimétrie) ou locale (précipitation), éventuellement après coloration, ex. au Bleu de Coomassie. Par exemple dans plusieurs méthodes dites d'immunoprécipitation (ex. Ouchterlony), l'anticorps présent dans un gel immobilise un antigène diffusant depuis un puits, et on visualise une ligne blanche représentant la précipitation du complexe immun formé. Il existe une variante faisant appel à l'électrophorèse (Fused Rocket Electrophoresis). D'autres techniques similaires

* chromatographie sur colonne: La solution de protéines est versée au sommet d’une colonne qui joue un rôle de filtre en fonction des caractéristiques chimiques de ses constituants: - chromatographie de filtration sur gel: les petites molécules sont retardées par les mailles du gel tandis que les grosses passent rapidement. - chromatographie d’affinité: les protéines sont retenues par des ligands (ex anticorps ou substrat) puis sont éluées par un solvant de force ionique élevée. - chromatographie

(antiseptique) des principes actifs des huiles essentielles. Si l’huile essentielle a un pouvoir antiseptique cela produit une lyse de la bactérie (éclatement de la cellule) et il y a donc libération de l’ADN bactérien. Nous allons donc par électrophorèse repérer la quantité d’ADN bactérien libéré qui sera proportionnel à la quantité de bactérie lysées par les principes actifs testés.15 Plus l’huile essentielle a une action antiseptique sur les bactéries plus l’ADN bactérien est libéré et inversement

............................................................. 8 1-2.2. Analyses hématologiques................................................................................................................................... 8 1-2.3. Immuno-électrophorèses.................................................................................................................................... 9 1-2.4. Analyses bactériologiques et parasitologiques........................................................

la séparation et le dosage de l'HbA1c. Les techniques de dosage doivent reconnaître spécifiquement l'HbA1 glyquée, à l'exclusion des autres hémoglobines, normales on non (A2, F, S, C…). Il existe de nombreuses techniques commercialisées : électrophorèses, chromatographies parmi lesquelles l'HPLC qui est la méthode de référence, techniques immunologiques. Il n'existe pas de vraie standardisation mais des recommandations émises par les sociétés savantes (National Glycohemoglobin Standardisation

protéines foliaires, une étape de dérivation des groupements carbonyles a été éffectuée par la dinitrophényhydrazine (DNP). Celle-ci permettra la détection de ces adduits par des méthodes immunoenzymatiques. Ce mélange protéique a ensuite subi une électrophorèse dénaturante (SDS-PAGE), suivi d’un transfert sur membrane (Western blot). L’utilisation d’anticorps anti-DNP a permis de démontrer la présence d’adduits protéiques issus du processus de dérivation des groupements carbonyles de la SSU. La quantité