Dosage Des Protéines

est une protéine présentant des propriétés de catalyse spécifiques d’une réaction chimique du métabolisme de l’être vivant. De ce fait, l’enzymologie englobe l’étude de toutes les réactions biochimiques assurées par les enzymes. Elles sont essentielles pour la vie. Connaitre comment une enzyme assure la catalyse renvoie à l’élucidation de son mécanisme qui implique le contact du substrat avec l’enzyme a travers les acides aminées du site actif. D’une manière plus générale, les protéines enzymatiques

le dev :Faible BStructure secondaire et tertiaire : prédict° de structure et bio-informatique+ Chaque AA préfère un environnement conformationnel donné+ Nbr outils bio-informatiques permettent de faire des prédict°4.4. Structure quaternaire-> protéines constituées de sous-unités, asso en structure tridimensionnelle-> correspond à l’asso de plsrs sous-unités en oligomères-> asso maintenue :Par liaison faibles entre sous-unitésPonts disulfuresSous unité peuvent être identiques :Ex : hémagglutinine

lactose et former de l’acide lactique qui acidifie le lait. A force de manipuler nos deux flacons de lait, les laits ont été en contact avec des bactéries. 6- la caséine : Pour les deux laits la caséine est dans les normes. La caséine est une protéine. Celle-ci est composée de différents fragments dans le lait: α1, α2, β, γ et K. La dernière (K signifiant kappa) permet au lait de rester homogène et non pas décanté. Elle est riche en acides aminés et en phosphore. On l'appelle un composant azoté

30mn pour mesurer la D.O á505nm. D.O Calculer le taux du glucose (G = g/l). D.O standard Valeurs normales : 0.70 -1.05 g/l 2- Créatinine : Le dosage de la créatinine est prescrit pour le diagnostic d'une altération de la fonction rénale et pour la surveillance des sujets insuffisants rénaux. C'est une méthode colorimétrique cinétique. Pour le dosage, on a besoin de 2 tubes un du standard et l'autre pour l'ech, le zéro du spectrophotomètre est ajusté par l'air. Ici, nous devons prendre 2 valeurs

les inhibiteurs. Il y a l’antithrombine et le système protéine C- Protéine S qui interviennent. La fibrinolyse : C’est le 3ième temps de l’hémostase, tend à détruire ou à empêcher de se former des caillots. Rôle de la plasminogène dans la fibrinolyse : produits de dégradation de la fibrine et du fibrinogène et les D-Dimères. 1. L’exploration de l’hémostase Hémostase primaire : temps de saignement, numération plaquettaire(+), dosage facteur Willebrand… Coagulation : TCA (temps de Céphaline

l’ampoule et les 2 supports pour faire la réaction de Hill. Voici le montage qu’il faudra avoir au final (vue de haut), avec l’ampoule blanche à 1 cm au-dessus de la paillasse : B- Dosage des chlorophylles Pour quantifier la Réaction de Hill, on doit utiliser une quantité connue de chlorophylles. On doit donc faire un dosage, qui est fait ici selon la méthode de Iwamura et al. (1970). Celle-ci est basée sur l'absorption de la lumière par les extraits de chlorophylles dans le méthanol 90%. Manipulation

l'iode sous sa forme tri-iodure, principe du dosage L'apha-amylase est supposé avoir un effet antibiotique et est retrouver dans des médicament comme la Lysopaïne ou le maxilase Les enzymes retrouvées dans une cellule, dépendent de son patrimoine génétique, les enzymes sont le plus souvent des protéines Un changement de pH peut influencer la structure de l'enzyme et ou de son substrat Le substrat peut posséder des fonctions acides bases Les protéines sont des polymères d'acides amines F La

nous utiliserons la chromatographie d’échanges d’ions pour séparer les constituants de notre mélange. 2) Dans un deuxième temps, nous mesurerons l’activité enzymatique de l’enzyme d’intérêt par un dosage enzymatique. 3) Enfin, nous procéderons à un dosage des protéines par un dosage colorimétrique de Bradford. II/ Principe : la chromatographie d’échanges d’ions La séparation des constituants d’un mélange par chromatographie d’échange d’ions repose sur l’adsorption réversible

EXTRACTION DE L'ALBUMINE PAR CHROMATOGRAPHIE D'AFFINITE BUT Le but de ce tp est de séparer une protéine précise, l’albumine d’un mélange de protéines par chromatographie d’affinité. PRINCIPES Purification de l'abumine par chromatographie d'adsorption : Les chromatographies d'adsorption sont des méthodes de séparation où la molécule d'intérêt d'un mélange complexe (albumine dans notre cas) est isolée des autres constituants parce qu'elle se lie spécifiquement à la résine ou matrice

volume utilisé pour le dosage spectrophotométrique de la gamme étalon est de 1,5mL. Chaque tube dosé doit avoir le même volume (1,5mL), auxquels nous ajoutons 2mL de Biuret. Réaction du Biuret La réaction du Biuret est la formation d’un complexe pourpre entre le Biuret (NH2-CO-NH-CO-NH2) et de deux liens peptidiques consécutifs en présence de cuivre en milieu alcalin. Le complexe de coordination résultant absorbe fortement dans le bleu (540nm). Ce qui permet de doser les protéines par spectrophotométrie