Roc Enzyme

LA LACTATE DÉSHYDROGÉNASE La lactate déshydrogénase ou LDH est une enzyme qui catalyse la réaction suivante : L-lactate + NAD⁺ <==> pyruvate + NADH + H⁺ Cette réaction permet pour la plupart des mammifères et des bactéries de faire de la fermentation lactique soit la réoxydation des cofacteurs (ici NADH,H⁺) en anaérobiose. Objectif : L'objectif de ce travail pratique est de purifier une protéine, en l'occurrence la LDH mais de façon partielle à partir d’un extrait cellulaire

trop fort quantité : 10 ng dans 50 (inhibition de l’amplification ou smear) l - Pas trop de séquences GC (difficile à dénaturer) - Dans des parties spécifiques du gène Les enzymes - Taq ADN polymérases : les plus utilisées (thermus aquaticus : Eubactérie) - Polymérases d’archaebactéries (pfu, pfx) - Chaque enzyme a ses propriétés intrinsèques (processivité, fidélité, [MgCl2] → Mise au point si on change d’enzyme - Fonctionnent jusqu’à 100°C mais cette température endommage l’ADN. - 0,2 à 1

multiplier un bout d’ADN double brin. Dans la PCR on utilise une ADNpolymérase(enzyme qui catalyse la synthèse d’ADN) qui est la TAQ : thermus aquaticus. • Les sulfodépendantes sont celles qui ont un métabolisme lié au souffre, elles réduisent le souffre. On les trouve au niveau des écosystèmes hydrothermo volcaniques. Finalement ces archébactéries sont importantes en industrie et en biotechnologie car elles possèdent des enzymes qui existent dans des conditions extrêmes. ❖ Comparaison Procaryotes

est composé de la bouche, de l’œsophage, de l’estomac, de l’intestin grêle, du gros intestin, du rectum et de l’anus. D’autres parties du corps tels le foie et le pancréas sont essentielles à la digestion puisqu’elles sécrètent des sucs et des enzymes permettant de faciliter la digestion et l’absorption des aliments. Ces deux parties entrent dans la catégorie des glandes digestives, tout comme les glandes salivaires et les glandes intestinales, puisqu’elles sécrètent des liquides permettant la

4. Effet de la concentration d’enzyme Lorsque [enzyme] Km et donc (13) [S]/([S] + Km) tend vers 1. Il s’ensuit que Vmax = k3[E]totale La substitution de l’éqn 13 dans l’éqn 12 donne l’équation de MichaelisMenten: [S] (14) V =V max [S] + K m L’équation de Michaelis-Menten décrit la courbe cinétique de Vo-[S]: - Pour des concentrations faibles de substrat, lorsque [S] >Km, V = Vmax et la vitesse est indépendante de la concentration de substrat. - La signification de la constante Km est évidente

entitled "GNU Free Documentation License". Université Paris 7 DEUG SNV décembre 1997 Compte rendu de TP de BC 232 (BC-022) 1ere partie Introduction La constante de Michaelis et la Vmax sont deux constantes qui caractérisent un couple enzyme/substrat. Le but de ces deux journées de TP serra de déterminer ces constantes et de dégager les caractéristiques et les différents aspects d'une réaction enzymatique. Extraction de la -galactosidase à partir de la bactérie Echerichia-coli

terminale 3’ CCA 5’ P anticodon Acides aminés (20) Des facteurs protéïques initiation : IF (Procaryotes), eIF (eucaryotes) élongation : EF (Procaryotes, eEF (Eucaryotes) libération ou terminaison : RF (Procaryotes) ou eRF (Eucaryotes) Enzymes AminoacylARNt transferases Translocase Peptidyltransferase Energie GTP, ATP A. 2 : Localisation de la traduction Eucaryotes : transcription (noyau) et traduction (cytoplasme) mitochondrie : traduction dans l’organite Procaryotes : tout

(chapeau ou cap) pour tous les ARNm nucléaires. C’est la première étape de la maturation et intervient dans le début de la phase de transcription après ajout de 30 nucléotides. Située ne 5’ de l’ARNm. Elle est constitué en 1-7 méthylguanylate. 3 enzymes : a. ARN triphosphotase qui clive le dernier phosphate de en 5’ de l’ARN b. Guanilyne transférase qui ajoute un guanilate + une liaion inhabituelle entre phosphore β de l’extrémité 5’ et le phosphore α d’une mol GTP c. Méthyl

acides ou des caractères acides. 4. Sur le plan effets secondaires : Les anti-inflammatoires provoquent une lésion de la muqueuse gastroduodénale. Les anti-inflammatoires non-stéroïdiens agissent en inhibant l'action de la cyclo-oxygénase (COX), une enzyme médiant la formation de prostaglandines à partir de l'acide arachidonique. En plus d'être des médiateurs inflammatoires, les prostaglandines ont aussi un rôle dans l'agrégation plaquettaire, la protection de l'estomac et la fièvre. Cela explique les

TP ENZYMOLOGIE ETUDE CINETIQUE DE LA PHOSPHATASE ALCALINE ET DETERMINATION DU PH OPTIMUM Introduction Les phosphatases sont des enzymes qui hydrolysent les monoesters phosphoriques. Ici, on étudiera les effets de l’enzyme sur le PNPP. La phosphatase alcaline hydrolyse le PNPP suivant la réaction suivante : PNPP + H2O PNP Cette réaction libère du PNP. Le PNPP est incolore, alors que le PNP est jaune en milieu alcalin, ce qui permet de le doser directement par spectrophotométrie à 410nm