tp lactate dehydrogenase protocole

528 mots 3 pages

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LA LACTATE DESHYDROGENASE:
PURIHCATION PARTIELLE PAR CHROMATOGRAPHIE D'AFFINITÉ
La lactate deshydrogénase catalyse la réaction:
L lactate + NAD+ <

- > pyruvate + NADH +H+

La lactate deshydrogénase (LDH) est un tétramère constitué de quatre sous-unités de 35 kDa. Chez les mammifères deux types différents de sous-unité existent, le type* M
(pour muscle) et le type H (pour heart), ce qui correspond à cinq formes d' isoenzymes tétramériques: MH3, H4

M4, M3H,

Bien que ces formes hybrides existent dans la plupart des tissus la sous-unité de type H prédomine dans le muscle cardiaque, tandis que la sous-unité de type M prédomine dans 'les tissus comme le muscle squelettique ou le foie.
Dans le cas d'infarctus du myocarde, létaux d'isoenzyme H4 dans le sérum augmente de façon dramatique dans les 12-24 heures, ce qui permet une confirmation du diagnostic.
La forme H4 a un KM faible pour le pyruvate, et l'enzyme est inhibée de façon allostérjque par de fortes concentrations de ce métabolite. L' isoenzyme M4 a un KM plus élevé pour le pyruvate, et celui-ci ne l'inhibe pas.
Les autres isoenzymes ont des propriétés intermédiaires qui varient en fonction du rapport des deux types de sous-unités.
Ces isoenzymes diffèrent non seulement par leurs constantes cinétiques mais également par leurs pH isoélectriques, le monomère H étant le plus chargé négativement à pH neutre^ou alcalin. Cette dernière propriété est utilisée pour séparer les isoenzymes de la
LDH par électrophorèse non dénaturante en gel de polyacrylamide.
Au cours de cette manipulation, la purification partiellede la LDH sera effectuée par chromatographie d'affinité sur bleu Cibacron fixé par covalence sur une phase stationnaire poreuse. La structure du ligand est la suivante:

0

NH

liaison covalente avec le support

\ relativement peu spécifique, et permet la purification d'un groupe de protéines et non pas d'une protéine unique; la purification de la LDH ne sera donc

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Rectus abdominis grenouille
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TP de Pharmacologie Mise en évidence et caractérisation d’un effet curarisant sur un organe isolé : Le muscle RECTUS ABDOMINIS de la grenouille. Objectifs: Ce TP a pour objectifs de nous montrer le mode d’action des curarisants, et de nous permettre de faire la différence entre un curarisant acéthylcholinocompétitif et acétylcholinomimétique, puis entre la plaque motrice et la jontion neuro-effectrice parasympathique.….

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Epreuve e5
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J'ai rien pour vous dsl =)
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comme le titre le demontre parfaitement, je n'ai rien pour vous (pour le moment ) lol et patati et patata ... 200 mots c'est beaucoup quand on a rien a dire ... je vais m'efforcer de vous donner des infos sur la 2eme guerre mondial mdr : * Elmouth, assis derriere sa mitrailleuse MG42, apercu au larges des cotes normandes, des centaine de petits points noirs ...; sans se poser de questions, il regarda son compagnon juste assis a coter de lui et lui dis : ** argh yaaa , ich look a klein point swartz in the mer !!! ** son compagnon Adolf lui repondit : ** klein point !!? das is das probleme mon general !! ** les deux hommes n'eurent pas le temp de terminer leurs petite conversation qu'ils etaient deja sous le feu des Ricains qui debarquais tranquil sur la plage ... THE END merci de m'avoir lu quand meme ^^ aozrekjz iezjro jzeijr ozerj izja o ijezroi zjo zejire….

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LA LACTATE DÉSHYDROGÉNASE La lactate déshydrogénase ou LDH est une enzyme qui catalyse la réaction suivante : L-lactate + NAD⁺ <==> pyruvate + NADH + H⁺ Cette réaction permet pour la plupart des mammifères et des bactéries de faire de la fermentation lactique soit la réoxydation des cofacteurs (ici NADH,H⁺) en anaérobiose. Objectif : L'objectif de ce travail pratique est de purifier une protéine, en l'occurrence la LDH mais de façon partielle à partir d’un extrait cellulaire de tissu bovin foetal au moyen d’une chromatographie d’affinité sur bleu Cibacron. (le bleu Cibacron a une structure proche du NAD⁺ qui est un cofacteur de la réaction impliquant la LDH d'où son utilisation) Principe de la chromatographie d’affinité :….

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Mérimée
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HYPERLINK http//www.comptoirlitteraire.com www.comptoirlitteraire.com Andr Durand prsente Lokis (1869) nouvelle de Prosper MRIME (58 pages) pour laquelle on trouveun rsum des notes (pages 3-12) et un commentaire (pages 12-16) Bonne lecture Rsum Chapitre 1 Envoy en Lituanie par la Socit biblique pour traduire Ivangile en jmoude, le narrateur, le Prussien Wittembach, professeur de linguistique compare, tait inquiet de voir les langues anciennes ou primitives tomber dans Ioubli, sefforait de les sauver ou de les reconstituer. Il fut invit chez le comte Michel Szmioth. Mais, son arrive, il ne le vit pas car il aurait souffert dune migraine.….

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Dissertation
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De retour chez lui, il compare les oscillations de deux pendules et travaille à la loi de l'isochronisme des pendules, dont le néerlandaisChristian Huygens découvre la vraie loi de l'isochronisme rigoureux (nécessitant l'invention d'un autre mouvement isochrone : le pendule cycloïdal alors que le pendule simple de Galilée n'est pas parfaitement isochrone) en décembre 16595, étape de la découverte d'une nouvelle science : la mécanique galiléenne6. Galilée trouve ainsi cette formule sur les lois du pendule simple (l étant la longueur du pendule,g la gravité et T la période) : T=2\pi\left( \sqrt\frac{l}{g} \right) Toutefois, ce ne fut qu'à la fin de sa vie, dans un ouvrage publié en 1638, qu'il exposa cette découverte.….

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