Intron

gène est constitué d'une alternance de régions codantes, appelées exons, et de régions non codantes, appelées introns. Seule l'information contenue dans les exons sert à la synthèse de la protéine. Pourtant, les introns comme les exons sont transcrits en ARN pré-messager. L'épissage est la principale modification qui a lieu lors de la maturation. C'est l'étape de suppression des introns et d'assemblage des exons, ce qui forme une nouvelle molécule l'ARN messager. Selon le contexte et notamment selon

EEE peer 5 3001 X12" x5) = 1 choix parmi 300, puis 1 pani 12, puis 1 Gene morcelé en fragments géniques Exons (codants) et introns (non codants) Sélection aléatoire de différents fragments : seuls quelques exons (et introns) sont sélectionnés Epissage : les introns sont élimings et 1 exon différent rariecodsopar),, | POUF chaque domaine (V, D, lapamiev2_ J) Possibilités quasi infinies de combinaisons a a Cellule souche Pere rane oar segments

spécifique lui indiquant la fin de la transcription, c’est le site de terminaison. L’ARN pré messager se compose de séquences codantes appelées exons entrecoupées de séquences non codantes dites introns. Après sa synthèse, la molécule subit ensuite une phase de maturation responsable de l’élimination de ses introns. Raccourci, L’ARN quitte le noyau de la cellule pour gagner le cytoplasme. Il est alors appelé ARN messager mature et est prêt à être traduit en protéine par un mécanisme appelé la traduction

ARN près messager ont été coupé l’ARNm est donc toujours plus court que le brin transcrit de l’ADN. Les parties qui ont été coupé correspondent à des séquences d’ADN qui ne sont pas indispensable pour la synthèse de la protéine. ON les appelle des introns qui contiennent donc une séquence non codante. Les zones qui ne sont pas coupé sont appelées escons. Elles contiennent une séquence indispensable pour la synthèse de la protéine. Ce sont donc des séquences codantes. Un gène est donc constitué d’une

gène. ARN pré-messager (nom masculin) : molécule d’ARN issue de la transcription d’un gène par l’ARN polymérase. Elle est formée d’une succession d’introns et d’exons. L’ARNm pré-messager subit une maturation qui consiste en l’élimination des introns et au raboutage des exons. Il devient alors ARN messager. Brin non transcrit (nom masculin) : plus simplement, on peut donc simplement remplacer les T par des U, pour cela on parle aussi de brin codant (à peu de chose près, il "détient" le code)

Complexes: Promoteur ADNc ADNc pA Promoteur ADNc * ADNc pA *IRES: Internal ribosomal entry site Construction simple Premier constituant: Séquence codante/ADNc Promoteur ADNc pA contrôle l’expression séquence codante Intron - amélioration de l’expression Poly A - Processing de l’ARNm • gène rapporteur • gène d’expression - Protéine - RNAi Gènes rapporteurs Organisation Promoteur séquences régulatrices d’intérêt Rapporteur pA • • • • • Gène LacZ

transcription ADN = brin non transcrit = brin codant Brin codant ( brin transcrit (T ( U) ARNm Les 2 séquences en amont du gène (CAT box et TATA box participent à la régulation de la transcription. Modulation des transcrits et élimination des introns Introns→ excision Exons→ epissage ADN brin non transcrit ou codant ( transcrit primitif ( ARN pré messagers Mise en place de la coiffe ou capping qui recouvre l’extrémité 5’ d’un acide guanilique métilé. De l’autre côté (3’) est prolongée d’une 100ène

d’insecte, ¢ de mammifères) IV – LE GENIE GENETIQUE DS L’INDUSTRIE PHARMACEUTIQUE IV-1 TECHNIQUES UTILISEES POUR SYNTHETISER UNE PROTEINE Pourquoi utiliser l’ADNc plutôt que l’ADN? ADN eucaryote (intron) Si on utilise des B* pr exprimer ces gènes  obstacle majeur: B* (pas d’enzymes d’epissage) Le gène (intron + exon)  ARNm  protéine ≠ de la protéine souhaitée == > utilisation de l’ADNc Obtention de l’ADNc Soit A partir des ARNm Synthèse chimique (petits gènes) NB/ la dégénérescence du code génétique

thymines seront remplacé par des uraciles. Le gène est constitué d’un promoteur, des introns que sont des séquences non codantes et des exons, des séquences codantes. Après avoir obtenu l’ARN pré-messager, celui-ci va maturer afin de devenir un ARN messager (ARNm), pour cela il faut l’ajout de la coiffe qu’est l’addition d’une guanine méthylée en 5’ du transcrit qui va servir ensuite dans la traduction, l’excision des introns puis l’épissage des exons car seulement les exons sont présents dans l’ARNm et

plusieurs protéines. Au sein des cellules eucaryotes, le gêne est formé de séquences codantes pour des proteines (les exons) séparées par des séquences non codantes (les introns). Sa transcriptions donne un ARN prémessager qui contient les mêmes séquences qeu celui-ci. L’ARN prémessager va subir une maturation appelée épissage : les introns sont éliminés et les exons sont raccordés entre eux : on obtient ainsi un ARN messager qui migre dans le cytoplasme. Il y a un plusieurs raccordement possibles. A partir