Svt amplification
Lobjectifest de réaiser une amplification suffisante dun fragment dADN pour que celu-ci soit identifiable lors dune électrophorese" dADN.
Les amorces sont choisies pour ciblr le fragment dADN, recherché, Si ce fragment est amplifié, a quantté sera tlle quil deviendra detectable, Sl riest pas amplifié, I restera indétectabe, lest impératif de bien respecter le protocole et de tra- vailler dans des conditions trés stricts (avec des gants
‘Rotamment): …afficher plus de contenu…
La PCR est & la base de la réalisation des tests ADN® qui connaissent aujourd'hui une utilisation croissante (voir cexercice 16 p. 58).
SS
|B Prtverent GADN pour amplification avant analyse.
La PCR repose sur les connalssances des mécanismes de la réplication de YADN ainsi que sur les propriétés de séparation et association des deux brins de la molécule fen fonction de la température : en chauffant & 95°C, on pprovoque la séparation des deux brins de la molécule dADN Puls, 860°C, onintielaréplicaton, quise déroule ensuite 8 72°C.
La mise en couvre de cette technique a été rendue possible parla découverte, chez desbactéris des sources,
chaudes, d/ADN-polymérases capables de fonctionner
‘aux températures emplayées (la polymérase …afficher plus de contenu…
Lamplifcation est donc exponentielle®.
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