Restriction calorique

B-L’hybridation permet le repérage d’une séquence d’ADN Digestion par enzyme de restriction ADN génomique extrait Fragments d’ADN Électrophorèse Séparation par taille Hybridation avec sonde sb marquée Choix température * Transfert sur membrane Par capillarité Dénaturation par NaOH Fixation Lavage autoradiographie b-les autres types d’hybridation Hybridation de colonies bactériennes Puces à ADN L’ARN peut aussi être hybridé : northern blot L’hybridation sur puce pour

Correction du devoir : enzymes de restriction et diagnostic génétique. Introduction : on cherche indiquer en quoi les enzymes de restriction permettent d'identifier des allèles chez des individus testés et à établir un diagnostic génétique de l'albinisme chez l'enfant à naître. Un point. Étude du document 2 : On étudie la transmission de la maladie et on détermine la probabilité pour l'enfant à naître d'être malade. L'individu II 2 est malade, si l'allèle morbide était dominant alors au

Résumé Durant ce TP, des molécules d'ADN ont été clonées, c'est-à-dire que leur quantité a été amplifiée. Ce clonage a été réalisé par transformation bactérienne à partir de plasmide Blue Script et de phage lambda digérés par des enzymes de restriction. A l'issue de cette manipulation ont été obtenus des plasmides transformés et recombinés. II/ Introduction Le but du clonage est de produire de grandes quantités d'ADN à partir d'un fragment donné. Ainsi une petite quantité d'une molécule

provoquée d’un fragment d’ADN d’intérêt. L’étude se porte surtout sur les manipulations qui aboutissent a l’obtention des clones de ce fragment .Une digestion de l’ADN du bactériophage lambda et du plasmide (pBluescript) s’est faite par des enzymes de restriction au début de l’expérience afin d’obtenir plusieurs fragments à bouts cohésifs. Une ligation est réalisée entre les fragments afin d’obtenir des plasmides recombinés. C es derniers ont été introduits dans des bactéries thermo-compétentes pour le clonage

développées précédemment. Elle se déroule en cinq étapes très précises. * 1ère étape :   On introduit, tout d’abord, le gène étranger dans un plasmide (ADN bactérien). On utilise pour cela différentes enzymes, notamment la ligase ou une enzyme de restriction qui agit de la même maniè-re. Sous son action, l’ADN est incorporé dans le plasmide lui conférant ainsi de nouvelles caractéristi-ques. C’est alors que l’on obtient un plasmide génétiquement modifié comprenant le gène étranger. * 2ème étape

Les Organismes Génétiquement Modifiés sont à la une de l’agriculture mondiale. Ils sont de plus en plus utilisés dans l’espoir d’améliorer les récoltes, cependant les OGM ne sont pas toujours à l’abri de tout reproches. Un organisme génétiquement modifié ou OGM est un organisme dont le matériel génétique, c’est-à-dire l’identité de cet organisme, a été modifiée par génie génétique afin de modifier l’organisation de son développement naturel. Un OGM est un organisme vivant au sein duquel

D'ADN. On veut ici séquencer l’A.D.N. (ou l'ARN) d’un organisme vivant, en faisant apparaître des bandes, susceptibles d’être comparées à un référent connu. On segmente d’abord l’A.D.N. en faisant agir une enzyme coupante (dite enzyme de restriction) qui coupe la molécule chaque fois qu'elle rencontre le long de l'ADN une séquence particulière de nucléotides, spécifiquement en un site de coupure. Les fragments obtenus, de longueurs très différentes, se comportent dans une solution appropriée

réactif) Enzymes qui dégradent ADN étranger: modification t restriction induit par l’hôte Modification et restriction induit par l’hôte Modification ADN: Marqueur spécifique d’une espèce voire souche Détermine le devenir de l’ADN d’une autre espèce Du soi et non soi (E.coli B détruit ADN E.coli et vice-versa) Enzymes de restriction Glycosylation: système non couplé entre existence du système de glycosylation et l’enzyme de restriction Méthylation: Système couplé entre existence du système

Généralité Les études de la biologie moléculaire sont le plus souvent anticipées par des techniques de base. Les principales techniques utilisée couramment sont : Les extractions des acides nucléiques Les digestions enzymatiques par les enzymes de restriction Les électrophorèses sur gel Objectifs Au cours de la première séance de Travaux Pratique, nous avons effectué une mini extraction d’ADN plasmidique à partir d’une culture de bactéries d’Escherichia coli, en utilisant la technique de la lyse

rôle des protéines est le clonage d'expressions. Dans cette technique, l'ADN codant la protéine qui nous intéresse est cloné en utilisant la réaction en chaîne par polymérase (PCR en anglais pour Polymerase Chain Reaction) et/ou des enzymes de restriction dans un plasmide (qu'on appelle vecteur d'expression). Ce plasmide peut avoir des éléments de séquences promotrices spéciales pour diriger la production de la protéine en question et peut aussi avoir des marqueurs de résistance antibiotique pour