Polyadénylation

possèdera-t-il pas de coiffe, mais il ne sera pas exporté vers le cytoplasme. La polyadénylation des ARNm Dans les cellules eucaryotiques tous les ARNm, à l'exception des ARNm codant pour les histones, possèdent une queue de poly (A) à leur extrémité 3'. La queue de poly (A) n'est pas codée dans le génome et elle est produite de façon post-transcriptionnelle par un clivage endonucléolytique au site de polyadénylation. Ce site est généralement précédé d'une séquence de reconnaissance dont la séquence

la transcription et de la traduction -Importance de la régulation post-transcriptionnelle basée sur la structure de l'ARN: atténuation, riboswitch, sRNA Les eucaryotes -Régulation de la transcription, épissage, polyadénylation et traduction -Couplage transcription/épissage/polyadénylation -Importance de la régulation post-transcriptionnelle: export de l'ARNm vers le cytoplasme, première traduction et NMD, miRNA et siRNA, contrôle de la stabilité des ARNm, localisation d’ARNm (mécanismes et utilité)

Compte tenu de l’absence des introns (ou presque) et d’un promoteur pour l’ARN pol II, les transcrits sont d’abord polycistroniques. Seul le promoteur du mini-exon est de type ARN pol II (Gilinger and Bellofatto, 2001). De plus, il semble que la polyadénylation de ce transcrit contribuerait à sa régulation stade-spécifique (Lamontagne and Papadopoulou, 1999). L’initiation de la transcription par l’ARN pol II reste encore un mystère. Il a été proposé que l’initiation se fait par hasard ou qu’il y a quelques

situé sur le chromosome 6p21.1 a une taille d’environ 11Kb. Il comporte 7 exons et 6 introns, sa transcription génère deux ARNm de 2,5 et 4,5Kb qui diffèrent uniquement par leur région 3’ non codante compte tenu de la présence de deux sites de polyadénylation sur le gène SRF. Ces deux ARNm sont traduits en une protéine unique, de 67 kDa. Cette phosphoprotéine de 508 AA chez l’Homme (504 AA chez la souris) comprend deux régions essentielles, représentées dans la Figure 1 ci-dessous : [pic]

kpb doté d’une queue de polyadénylate comportant 250 résidus (Tan et al, 1992). Les comparaisons entre la séquence génomique et le messager isolé ont initialement permis de situer le début de transcription 307 pb en amont de l’ORF et le site de polyadénylation 32 pb en aval de celle-ci (Nazarali et al, 1992 ; Tan et al, 1992). Une mutagenèse dirigée réalisée en 2001 indique cependant que la transcription du gène débuterait environ 100 pb en amont de l’ATG (Ohnemus et al, 2001). Le mode d’expression

nécessaires à l'élongation et à la terminaison qui peuvent jouer un rôle dans le contrôle de la synthèse d'ARN mesagers. *Remarque : Les signaux de terminaison sont moins bien connus que chez les procaryotes, par contre on connait des signaux de polyadénylation (l'ajout d'une séquence polyadénylée en 3' OH des messagers eucaryotiques fait partie de la maturation). 2.2.3.2 MATURATION La maturation de la plupart des transcrits primaires porte sur 3 points : la formation d'une structure particulière

plus importante. MATURATION DES mRNA DES EUCARYOTES La maturation de la plupart des pré-mRNA des Eucaryotes comporte plusieurs étapes : formation de la coiffe, élimination des introns, clivage et polyadénylation ; l’élimination des introns, peut avoir lieu avant ou après le clivage et la polyadénylation. Toutes les étapes s’effectuent au sein du noyau (Figure 19.4A). Formation de la coiffe Bien avant d’être terminé, le transcrit primaire constitué alors de 20 à 30 nucléotides est modifié à son extrémité

2007 Biologie génique - Pr A. Raisonnier 31/183 Les polymérases 2.13 Poly(A) polymérase BG 14 • • L’extrémité 3’OH terminale du dernier exon du transcrit est d’abord coupée par une nucléase environ 15 nucléotides après la boîte de polyadénylation. Ensuite, une polymérase additionne des nucléotides à adénine (plusieurs centaines) pour constituer une « queue » polyA. La réaction se fait sans matrice, à partir de l’ATP et en présence de Magnésium. Le pyrophosphate produit est hydrolysé. La

plus importante. MATURATION DES mRNA DES EUCARYOTES La maturation de la plupart des pré-mRNA des Eucaryotes comporte plusieurs étapes : formation de la coiffe, élimination des introns, clivage et polyadénylation ; l’élimination des introns, peut avoir lieu avant ou après le clivage et la polyadénylation. Toutes les étapes s’effectuent au sein du noyau (Figure 19.4A). Formation de la coiffe Bien avant d’être terminé, le transcrit primaire constitué alors de 20 à 30 nucléotides est modifié à son

Terminaison de la transcription Chez les bactéries, la transcription est terminée par une séquence d’ADN appelée terminateur. Chez les eucaryotes, l’ARN polymérase II fait transcrire une séquence d’ADN appelée signal de polyadénylation, qui code pour un signal de polyadénylation dans la molécule de pré-ARNm: AAUAAA, 10 – 35 nucléotides en amont du signal AAUAAA, les protéines associées à l’ARNm transcrit vont le libérer de la polymérase. 11.4. Modification de l’ARN après transcription Chez les