PCR

Nature de la sonde ADNc double brin Origine de fabrication Obtenu par clonage dans un plasmide et amplifié par PCR - Forte stabilité Avantage - Obtenu en grande quantité ADNc monocaténaires Obtenu par clonage dans un plasmide et amplifié par PCR asymétrique - Forte Stabilité - Ne nécessite pas de dénaturation - Pas d’hybridation inter-sonde - Marquage lors de la synthèse par PCR Inconvénients - Nécessité de la dénaturer avant son utilisation - Possibilité de ré hybridation sur elle-même -

Stages à partir de 3ans - Animations - Ventes d’équidés - Elevage 2 ORGANIGRAMMES Organigramme de la SARL : Organigramme de l’équipe du PCR : Le PCR est une petite entreprise avec la propriétaire et trois salariés. Aurore ; gérante du poney club de Rueil, elle est monitrice et s’occupe de toute l’administration. Benoit ; moniteur à mi-temps, il fait les cours des enfants, et aide Aurore

au brin dont on veut déterminer la séquence Rôle : détermination des séquences génomiques des Organismes importants 2-La PCR (Polymerase Chain Reaction) : ACP= Amplification en Chaîne par Polymérase Principe : *Succession de réplication d’une molécule d’ADN db ciblé (Millions de fragments précis/heure) *3ème cycle : la quantité initiale d’ADN x 8 *La PCR a lieu dans un petit tube installé dans un thermocycleur. Contenu du tube : ADN cible , Les oligonucléotides, Taq poly ,bases

RP/A010 Personne compétente en Radioprotection (PCR) - Module théorique commun  Objectifs pédagogiques Assurer la mission de la Personne Compétente en Radioprotection (PCR) au titre de l’article R. 4451-103 du Code du travail, après avoir complété cette formation par le module pratique correspondant au secteur d’activité et aux sources de rayonnements détenues dans l’établissement.  Personnes concernées - Prérequis Personne désignée pour assurer la mission de personne compétente

(Gupta et al., 1999 ; Santoni et al., 2000 ; Langridge et al., 2001). Ces méthodes peuvent être regroupées en deux grandes catégories : les marqueurs de type RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism) et les marqueurs basés sur la méthode de PCR (Polymerase Chain Reaction). Le choix du système de marquage dépend de l’objectif précis fixé, des moyens et des compétences disponibles au laboratoire. Nous décrirons brièvement les principaux systèmes de marquage moléculaire appliqués chez le

technique de séquençage EVOLUTION DE LA TECHNIQUE DE SANGER - Didésoxynucléotides marqués avec des fluorophores - Le séquençage des produits de PCR AUTOMATISATION - Les séquenceurs en gel plat - Les séquenceurs capillaires EVOLUTION DE LA TECHNIQUE DE SANGER - Didésoxynucléotides marqués avec des fluorophores - Le séquençage des produits de PCR AUTOMATISATION - Les séquenceurs en gel plat - Les séquenceurs capillaires Séquenceur à plaques Séquenceur capillaire Exemple d’enregistrement

profondes : abcès différents organes poumon, rate, foie, articulations, SNC. Mort fréquente–B. cepacia: Pathogène opportuniste, infections localisées | •Directe (mettre en évidence l’agent)−B. mallei, B. pseudomallei:•Culture, laboratoire de type L3•PCR•Indirecte (mettre en évidence la réponse immunitaire)–B. mallei, B. pseudomallei: Réaction de fixation du complémentELISAWestern Blot (test dérivé de lélectrophorése)–Malléination: test à la malléine = test intradermopalpébralou sous-cutané test+ :

La PCR : une biotechnologie révolutionnaire La PCR (de l'anglais polymerase chain reaction) est la technique d’amplification de l'ADN (acide désoxyribonucléique) la plus utilisée en biologie moléculaire. Elle est à l'origine du décodage complet du génome humain et ses applications concernent de nombreux secteurs de la recherche scientifique (diagnostic de certaines maladies, identification génétique à partir d'échantillons de cheveux en criminologie, etc.). La PCR utilise une enzyme

séquence. Les extrémités complémentaires adhéreront l'une à l'autre par l'intermédiaire des liaisons hydrogène. Vient ensuite l'ADN ligase, qui forme des liaisons covalentes entre les extrémités. Multiplication de la construction génétique : la PCR La technique d'amplification génique in vitro connue sous le sigle P.C.R. (Polymerase Chain Reaction) consiste en une multiplication exponentielle d'un fragment d'acide nucléique dont la taille est généralement comprise entre 200 et 3 000 paires

ou egal a 20 pb? 9-a quoi sert de connaitre la Tm d un oligonucleotide? 10- le bleu de dépôt est composé de bleu de bromophenol, xylene cyanol et glycerol. donner le rôle de chacun 11- précautions a prendre pour eviter une contamination PCR 12- dites pourquoi la DHPLC est meilleure dans la detection des variations de sequences que la SSCP et DGGE 13- donner au moins 2 arguments différentiant l hérédité autosomique dominante et l heredite mitochandriale 14-a quoi sert un haplotype