Ltiquette dun mdicament indique une teneur de 500 mg de tyrosine par capsule. La puret du mdicament sera vrifie par chromatographie sur couche mince La teneur en tyrosine sera dtermine par colorimtrie. 1. tude qualitative par chromatographie sur couche mince Solution T mise en solution dune capsule dans 1 litre de solution dHCl 0,2 mol/L , puis filtre. 1.1.Prparation des phases Phase stationnaire Identifier une plaque de gel de silice Marquer la ligne de dpt 1,5 cm du bord infrieur. Ractiver les plaques de gel de silice ltuve 110 C pendant 15 min. Phase mobile (sous la hotte) Mettre environ 8 mL de phase mobile dans une cuve et laisser saturer au moins 20 min. Composition de la phase mobile n butanol 4V acide actique 2V eau 1V 1.2. Ralisation du chromatogramme Dposer en 3 fois, en schant bien entre chaque dpt les tmoins Tyrosine - Proline - Arginine - Acide glutamique. l chantillons analyser solution T Faire migrer dans la cuve chromatographie. Lorsque la phase mobile a atteint les 4/5 de la hauteur de la plaque, noter le front du solvant laide dun crayon de mine. Laisser scher la plaque. Pulvriser de la ninhydrine sous la hotte. Porter ltuve 110C pendant 10min. Dterminer les couleurs et les Rf de chaque dpt. 1.3. Rsultats tablir un tableau de rsultats (Nom de lchantillon, d, D, Rf , couleur) Donner un plan de plaque. Calculer les Rf de chaque tache. Analyser la composition en acide amin du mdicament. Scurit Ninhydrine Xn R 22-36/37/38 S - Butanol Xn, F R 10-22-41 S26 Acide actique C R10-35 S26-45 2. Dosage colorimtrique de la tyrosine par la mthode dAnson Principe En milieu alcalin le ractif de Folin Ciocalteu ragit avec la tyrosine en donnant une coloration bleue permettant un dosage colorimtrique. Ractifs Solution E solution talon de tyrosine 250 mg/L dans HCl 0,2 mol/L HCl 0,2 mol/L NaOH 0,2 mol/L Ractif de Folin Ciocalteu au 1/2 prparer extemporanment 3 mL de ractif pur 3 mL deau Solution T mise en solution dune capsule dans 1