Compte rendu tp svt tp

1874 mots 8 pages
MOUVI Yao Armel & CHEBBAH Fella Yasmine
Compte rendu TP Partie 1 Clonage du gène ESR1 dans le vecteur plasmidique pGFP pour obtenir la protéine fusion (GFP-ERα)
I-But :
Le but des toute ces séances de TP sont de rétablir via un vecteur d’expression, l’expression de la protéine Erα (récepteur des oestrogènes) dans la lignée cellulaire de carcinome mammaire
(MD1-MB-231)
Le but plus particulièrement des deux premières séances de TP est de cloner le gène ESR1 dans un plasmide pour faire
…afficher plus de contenu…

Ce plasmide a été digéré, puis nous …afficher plus de contenu…

Afin de vérifier l’une ou l’autre de ces hypothèses nous aurions pu faire une coloration de gram.
Nous sommes revenus une semaine plus tard pour la suite des TP commun et nous avons à nouveau regarder notre boîte (cf boîte 2).
Nous constatons l’apparition d’un autre type de colonie, ceci vient donc plutôt confirmer l’hypothèse 2 à savoir une contamination. Cette contamination peut être dure à la manipulation dans des conditions non aseptiques. Sur conseil de notre professeur nous n’avons pas utilisé des colonies de notre boîte pour la suite à savoir les étapes d’extraction plasmidique et de la PCR, nous avons utilisé une boîte contrôle.
Séance 2 :
Notre analyse se réalisera comme binôme 2 (puits 8,9 et

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