Thymidine

adénine 5) thymine Réponse N N H3C NH N H O 6-2 : Identifiez les nucléosides suivants. A) B) OH OH N O N OH HO OH C) NH HO O HO O O HO N OH NH O Choix : 1) guanosine 2) uridine 3) cytidine 4) adénosine 5) désoxythymidine 6) thymidine Réponse HO O N OH N NH NH2 E) OH O N O O N N D) OH CH3 O N N N HO NH2 O NH2 6-3 : Nommez les nucléotides suivants A) O O P O O P O CH2 O NH2 O N N O O OH HO B) O N O P O O CH2 NH2 N O N N HO OH C) CH3 O

unités monomériques des acides nucléiques L'unité formée d'une base liée à un sucre est appelée nucléoside. Les 4 nucléosides de l’ARN sont adénosine, guanosine, cytidine, uridine. Ceux de l’ADN sont désoxyadénosine, désoxyguanosine, désoxycytidine, thymidine (on parle rarement voire pas du tout de « désoxythymidine » car la thymine est forcément associée à un désoxyribose). Dans tous les cas, c’est le N9 de la purine et le N1 de la pyrimidine qui sont liés au C-1’ du sucre. *monomère = un seul Exemple

liliacées) sur un milieu contenant des nucléotides non radioactif sur plusieurs générations. Ces racines sont ensuite placées pendant la durée d'une interphase dans un milieu contenant de la thymidine tritiée* (milieu 1), puis elles sont soigneusement lavées et placées dans un milieu contenant de la thymidine non radioactive (milieu 2). Dans un premier temps, il prélève des cellules du milieu 2 après un temps permettant aux cellules de finir leur cycle cellulaire commencé dans le milieu 1. Les chromosomes

FUSION DES CELLULES PRODUCTION DES HYBRIDOMES ISOLEMENT DES HYBRIDOMES OBTENTION DES CELLULES HGPRT Hypoxanthine Voie exogène AMP Inosine MP IMP GMP Azasérine Aminoptérine Synthèse endogène Aminoptérine Thymidine Thymidine Kinase TMP Milieu HAT : Hypoxanthine, aminoptérine, thymidine Milieu Haza : Hypoxanthine, azasérine A. LA RÉACTION DE PRÉCIPITATION 2 : EEN MILIEU GÉLIFIÉ : 2.1 IMMUNODIFUSION DOUBLE (OUCHTERLONY) 2.2 IMMUNODIFUSION LAURELL 2.3 IMMUNODIFUSION RADIALE (MANCINI) 2

il est possible d’étudier les mécanismes qui régulent le cycle. Quatre méthodes d’étude du cycle cellulaire ont permis la mise en évidence des étapes : • La cytophotométrie • La cytofluorométrie de flux • L’autoradiographie après marcage à la thymidine tritiée • L’immunocytochimie La majorité des études a été réalisée sur des cellules en culture dont tous les représentants peuvent se diviser. L’avantage est de pouvoir avoir une source illimitée de cellules standardisées et génétiquement homogènes

pour la transfection de gènes. Les applications cliniques sont nombreuses comme par exemple les insertions de gènes suicides dans le traitement des tumeurs. Le but de ce TP sera d’insérer un gène d’intérêt thérapeutique dans un plasmide, le gène thymidine kinase du virus de l’hérpes. Pour cela nous utiliserons trois plasmides différents et toute la machinerie de biologie moléculaire dont nous disposons. Construction du vecteur pUT

nucléotide typique de l'ADN, la thymidine (T) c'est-à-dire le nucléotide contenant de la thymine - Le marquage a consisté à remplacer certains atomes d'hydrogène de T par un isotope radioactif, le tritium (3H), ce qui forme de la thymidine tritiée. Lorsque les cellules synthétisent de l'ADN, elles incorporent ce précurseur et l'ADN formé est alors radioactif. Cette molécule devient détectable par la technique d'autoradiographie : des cellules cultivées en présence de thymidine tritiée sont écrasées et

et receveurs : dans un puits de culture quand on veut observer la prolifération de lymphocyte. La thymidine qui va être marqué radioactivement, c’est un élément qui est incorporé dans le matériel nucléaire de la cellule. Donc une cellule qui prolifère, doit l’intégrer. On incube donc la cellule avec la thymidine tritié et si prolifération, intégration de la thymidine, puis lavage pour éliminer thymidine non fixé par la cellule. Puis mesure de la radioactivité incorporée dans les cellules. Mesure

nucléotide typique de l'ADN, la thymidine (T) c'est-à-dire le nucléotide contenant de la thymine - Le marquage a consisté à remplacer certains atomes d'hydrogène de T par un isotope radioactif, le tritium (3H), ce qui forme de la thymidine tritiée. Lorsque les cellules synthétisent de l'ADN, elles incorporent ce précurseur et l'ADN formé est alors radioactif. Cette molécule devient détectable par la technique d'autoradiographie : des cellules cultivées en présence de thymidine tritiée sont écrasées et

est constituée de deux brins en hélice, ces deux brins constituent une double hélice. Nous avons constatés qu’un brin est constitué de 4 nucléotides qui sont: Adénosine(A), Thymidine(T), Cytidine (C), et Guanosine (G), ces nucléotides forment une séquence en nucléotides. Sur chacun des brins l’Adénosine est en face de la Thymidine et de même pour Guanosine est en face Cytidine. L'escargot des haies, est une espèce dont les individus possèdent une grande diversité de coquilles. Chez les escargots