PCNA

La réplication est le processus au cours duquel l'ADN est synthétisé grâce à l'ADN polymérase. Ce mécanisme permet d'obtenir, à partir d'une molécule d'ADN, deux molécules identiques à la molécule initiale. Puisque les deux chaînes de l'ADN ancien se séparent et que deux nouvelles molécules sont formées, on qualifie ce processus de semi-conservateur. L'ADN a l'importante caracteristique de pouvoir être reproduit à l'identique, ce qui permet à l'information génétique de se transmettre d'une

pour la levure, 50 millions chez l’homme. Les différentes DNA polymérases : • DNA polymérase α possède l’activité primase ≠ chez les procaryotes. • DNA polymérase δ : s’occupe de la synthèse discontinue d’ADN. Vf tableau RS-C: clamp loading, PCNA: clamp sliding, MCM complex: hélicase, FEN 1 (flap endonucléase) : RNase qui reconnaît l’amorce décalée par l’ADNpoly lors de la fusion des fragments d’okasaki, H1 : RNase, il en existe une 3ème appelée dna2. DNA ligase 1 : reconstitue l’intégrité

contraire, sont très fortement liées au brin matrice et ne se dissocient pas. Elles peuvent polymériser plusieurs centaines de milliers de nucléotides en une seule fois. On parle alors d'ADN polymérases processives. Un cofacteur protéique, le clamp (appelé PCNA chez les eucaryotes et complexe β chez les bactéries) se lie aux polymérases réplicatives et augmente considérablement leur processivité. L'activité des ADN polymérases nécéssite la présence d’ion magnésium comme cofacteurs qui se fixent en particulier

se trouve une protéine Rad6, qui va ajouter une Ubiquitine à la protéine PCNA. Cette addition provoque le changement de la conformation de PCNA pour qu’elle reconnaisse l’ADN polymérase translesionnelle (pol) qui va ajouter les bases sur le brin opposé à celui contenant les bases endommagées. L’élimination enzymatique de l’Ubiquitine de la protéine PCNA permet de L’élimination enzymatique de l’Ubiquitine de la protéine PCNA permet de dissocier l’ADN polymérase trans-lésionnelle et de reprendre la

ARNr. L’ADN polymérase α on une fonction de primase. Les ADN polymérases δ et ε sont responsable de la réplication du brin précoce et des fragments d’Okasaki. L’ADN polymérase δ est très processif en présence de PCNA et l’ADN polymérase ε est très processif même en absence de PCNA. Le PCNA (ou proliferatingcellnuclearantigen) est une molécule qui aug-mente fortement la processivité ; elle peut être comparée à un collier coulissant associé à l’ADN polymérase (on parle de clamp β chez E-Coli). Au niveau

risque infectieux (la température augmente en cas d'infection); nous controlons aussi tous les dispositifs mis en place: perfusions (fonctionnelle ou non, point de ponction non inflammatoire), redon (quantité présente, et s'il est toujours aspiratif), PCNA (administration d'analgesiques par pose de cathéter, utilisé pour la prevention de la douleur) et PCA (« Patient Control Analgesia » c'est un traitement de la douleur aiguë, surtout post opératoire, le patient est relié à une pompe et s’administre

brins + réparation => 2 tours de surenroulement à la fois. Inhibiteurs : Eucaryotes = cellules cancéreuses Procaryotes = antibiotiques (quinolones) 3.3 – Réplisome chez eucaryotes ~ Idem à procaryotes, mais complexité +++ MCM # hélicase DnaB PCNA (proliferating cell nuclear antigen) # Clamp  RPA (replicating protein A) : # SSB protéines RCF (Replication C Factor) = chargeur de clamp (d’après Garg et Burgers, 2005) Différences avec procaryotes : - ADN pol  = ADN pol + fonction de primase

polymérase une activité 3'5'exonucléase : Synthèse (et correction continu) du brin directeur DNA polymérase γ : retrouvée d'abord dans les mitochondries (rôle spécifique de polymérisation ADN mitochondrial) DNA polymérase β : appelée aussi PCNA (proliferating cell nuclear antigen), fonction voisine de la sous unité β de la DNApol III de Escherichia coli DNA polymérase ε : remplace δ pour des réactions de réparations 2- Comparaison de la transcription des gènes entre bactéries et Eucaryotes

directement liée à l’hélicase et forme une unité sur le brin tardif appelée primosome qui synthétise les amorces d’ARN. Voir figure Les clamp Pour éviter la dissociation de l’ADN polymérase sur l’ADN, une protéine accessoire (clamp chez E.coli et PCNA ou Proliferation Cell Nulclear Antigen chez l’homme), fonctionnant comme un nœud coulant, maintient l’enzyme sur l’ADN. Quand l’ADN polymérase se bloque après la synthèse, le clamp est libéré, et va s’assembler avec la polymérase sur l’amorce suivante

ARNr. L’ADN polymérase α on une fonction de primase. Les ADN polymérases δ et ε sont responsable de la réplication du brin précoce et des fragments d’Okasaki. L’ADN polymérase δ est très processive en présence de PCNA et l’ADN polymérase ε est très processive même en absence de PCNA. Le PCNA (ou proliferating cell nuclear antigen) est une molécule qui augmente fortement la processivité ; elle peut être comparée à un collier coulissant associé à l’ADN polymérase (on parle de clamp β chez E-Coli). Au