Gel Antibactériens

plusieurs fragments d’ADN de tailles différentes. 2- Digestion d’un plasmide (pBluescript) avec Eco R1 et Hind III. Vous allez cloner les fragments de l’étape 1 dans ce plasmide. 3- Inactivation des enzymes de restriction. 4- Analyse par électrophorèse sur gel d'agarose des fragments d’ADN produits pendant les digestions 1 et 2. 5- Ligation des fragments produits dans l’étape 1 dans le plasmide, utilisant une ligase (une « colle moléculaire »). 6- Introduction des molécules recombinantes produites pendant

10X. Le professeur a également ajouté 1µL des deux enzymes de restriction précédentes. De même, l'incubation à 37°C a durée 1h30. Au terme de ces deux incubations, nous avons procédé à une électrophorèse avec les deux produits obtenus. Pour cela un gel d'agarose a fallu être préparé de la même manière que détaillé précédemment puis coulé dans une cuve à électrophorèse. 2 µL des deux solutions incubées ont été introduites séparément dans deux tubes Eppendorf contenant 8µL d'eau et 2µL de tampon de

5375G_TS5_V3_FRCorr_EP6.qx:XXXX_Vision1_MatRepro_1.qx 26/10/10 13:51 Page 29 corrigé des fiches reproductibles 3 Page 8 Soutien 3.2 1. a) m CE ϭ 2,8 b) m CE ϭ 3 a ϩ ab Ϫ c c 2 e) m CE ϭ 2. a) x ϭ 1,25 cm 2 c) m CE ϭ 8 d) m CE ϭ b c) x ϭ 10 cm d) x ϭ ͙ෆ 14 cm f ) m CE ϭ ͙ෆෆළ c2 ϩ ෆ bc b) x ϭ 5,8 cm Page 9 Soutien 3.2 (suite) 3. x Ϸ 6,43 m, y ϭ 10 m et z Ϸ 8,33 m. 4. a) Oui. b) Non. c) Non. d) Non. 5. La distance qui sépare

produits d’amplification Préparation du gel d’agarose et electrophorèse : L'électrophorèse en gel d'agarose est une méthode utilisée en biochimie et en biologie moléculaire pour séparer l'ADN, l'ARN ou des protéines en fonction de leur poids moléculaire.La technique de l'électrophorèse en gel d'agarose est basée sur la séparation des acides nucléiques chargés négativement sous l'effet d'un champ électrique. Cette séparation s'effectue à travers la matrice du gel d'agarose : les molécules de plus petites

protéines dans un gel, par exemple d’agarose, qui est constitué d’une matrice polymère (agarose et polyacrylamide) qui baigne dans un tampon conducteur (solution qui maintient à peu près le même pH malgré l’addition de petites quantités d’acide ou de base). L’agarose sert à séparer de l’ADN ou de l’ARN alors que le polyacrylamide permet de séparer des molécules plus petites comme des fragments d’acides nucléiques ou des protéines. Puis on applique une tension aux extrémités de ce gel et ainsi les protéines

permettent au verre d’existé comme l’un des matériaux les plus courant dans notre vie alors qu’il fut crée il y a fort longtemps Ensuite, nous avons fait des recherches sur le futur du verre, notamment sur le procédé de fabrication « sol-gel » Travail personnel : La majeur partie du travail a été fait chacun de notre coté, nous nous sommes répartis la rédaction des différentes parties et les recherches selon ce que l’on avait chacun commencé pendant nos deux heures

donc aussi se multiplier. Des cultures de bactéries sont faisables, ce qui va donner des centaines de milliers d'exemplaires du plasmide. C'est le principe du clonage. Résultats: A la suite de notre premier clonage une première électrophorèse sur gel d'agarose a été réalisé. En parallèle de la migration des fragments d'adn, un marqueur et introduit dans électrophorèse afin de déterminer la taille des fragments obtenus à l'issue de la digestion. Pour le plasmide on retrouve les taches a la bonnes

hydrolyse de l'ADN par une enzyme de restriction. Cette enzyme de restriction permet de couper un fragment d’ADN. Ensuite pour pouvoir séparer ces fragment de restriction il faut les séparer par électrophorèse sur gel d'agarose : cette séparation s'effectue à travers la matrice du gel d'agarose ; les molécules de plus petites tailles se déplacent plus rapidement et migreront plus loin que les molécules de tailles supérieures. [pic] [pic] Agarose : Macromolécule à base d'agar

Atelier 2 CSS Semestre : 1 Session (Principale / Rattrapage) : Principale | | Préparé par : UP WEB Classe : 4ème info B 1, 2, 3 | Documents autorisés : Oui Nombre de pages : 2 | | Le but de cet atelier c’est de réaliser le fichier menu.css permettant de réaliser, sur la première page « menu.html », le style que vous voyez ci-dessous. Pour la deuxième page « platsJour.html » faites le style en interne. Remarque : Aucun style dans les balises pour

coli, d’établir la carte de restriction du plasmide grâce à sa digestion par des enzymes et enfin d’isoler et purifier le fragment d’intérêt wzc dans pUC18-wzc. II. Principes : Pour mener à bien ce TP on utilise la technique d’électrophorèse sur gel d’agarose. Cette technique permettra la séparation des différents fragments obtenus par digestion, en fonction de leurs charges (application d’un champ électrique) mais surtout en fonction de leurs tailles (agarose).Le gène wzc est ainsi purifié.