Chromatographie préparative

localisation, dans un peptide, du site d’interaction avec un glycosaminoglycane naturel : l’Héparine. Pour cela, on utilisera une méthode d’analyse et de purification : la chromatographie en phase inversée avec appariement d’ions en HPLC. PRINCIPE : * Chromatographie en phase inversée avec appariement d’ions : Dans la chromatographie en phase inversée, c’est la phase stationnaire, constituée souvent d’un hydrocarbure, qui est apolaire La phase mobile est un solvant polaire, tel l'eau, le méthanol

séparer deux acides aminés constitutifs d’un peptide : l’alanine et l’arginine par une hydrolyse puis par chromatographie sur échangeuse d’ions, puis d’effectuer le dosage de l’alanine et la mise en évidence de l’arginine. 2. PRINCIPES Nous réaliserons pour commencer le TP, l’élution de l’alanine afin de pouvoir la doser. La chromatographie échangeuse d’ions est un type de chromatographie en phase liquide permettant d’isoler une substance chargée électriquement d’un mélange de molécules chargée

Chromatographie sur couche mince Principe 1-Définition : C’est une méthode de séparation, non destructrice en son principe, basée sur le fait que le coefficient de partage d’un soluté entre deux phases dépend de la nature du soluté, et donc, si l’une des phases est mobile par rapport à l’autre, les solutés mettront un temps plus où moins long à parcourir le chemin imparti à cette phase mobile. On peut distinguer deux objectifs principaux : Objectif analytique. Il s’agit d’identifier

CHROMATOGRAPHIE La chromatographie est une méthode d'analyse chimique qualitative permettant la séparation et l'identification des espèces chimiques d'un mélange. TECHNIQUE DE LA CHROMATOGRAPHIE SUR COUCHE MINCE. 1) Phase fixe. Rectangle de papier filtre (environ 4 cm x 8 cm) ou plaque (gel de silice sur plastique ou aluminium). On trace au crayon, sans appuyer, un trait fin à 1 cm un trait fin à 7 cm du bas du rectangle de papier

breveté. HE + autre. trois injections : essence lavande sans étalonnage ni dodécane a concentration connue dans l'injection, puis étalon interne (solvant =hexane ??) puis extraction par solvant. Pour le titrage du camphre, nous utilisons une chromatographie en phase gazeuse à l’hélium avec une colonne à injecteur/diviseur de 30m et de 0,25mm de diamètre. Le débit de colonne est de 2 μl/min et le débit d'aiguille est de 50 μL/min. Ainsi, le volume injecté dans la colonne à distillé est divisé par

produit obtenu est bien de l'acide benzoïque, on réalise une chromatographie sur couche mince sensible aux UV. On prépare une solution éthérée d'acide benzoïque A, d’alcool benzylique B et du produit de la synthèse C. L'éluant utilisé est un mélange de 4 mL de cyclohexane et de 2 mL d'acétone. Dans ces conditions Rf(alcool benzylique) = 0,7 et Rf(acide benzoïque) = 0,25. - Rappeler le principe de révélation d'une chromatographie sur couche mince sensible aux UV. - Dessiner le chromatogramme

composition et la structure d’un diholoside B grâce à la spécificité d’action de glycosidases et de tester grâce a la liqueur de Feeling, la réduction éventuelle des sucres. 2/ Principe : 1) Principe de la chromatographie sur couche mince : La chromatographie sur couche mince est une technique de séparation de constituants à partir d’un mélange. Elle comprend deux phases : -Stationnaire : gel de silice qui est polaire -Mobile : un solvant (mélange acétone-eau) qui entraine

catalysent la coupure de la liaison osidique R1-O-R2 par les extrémités des osides en libérant au moins un ose. Une osidase est spécifique d’un ose, d’une forme cyclique (pyrane ou furane) et d’un anomère α ou β. La Chromatographie sur Couche Mince (CCM) est une chromatographie d’adsorption qui repose sur la séparation des composés en fonction de la polarité dans une cuve où l’on y dépose une phase stationnaire (gel de silice polaire) et une phase mobile (mélange de solvant moins polaire). Le

Réaliser le protocole expérimental de lavage (15 min conseillées) 7 2. Elaborer un protocole d’analyse par chromatographie sur couche mince et le réaliser (25 min conseillées) 7 3. Interpréter la CCM et le spectre RMN du proton (20 min conseillées) 8 IV. REPÈRES POUR L’ÉVALUATION 9 1. Réaliser le protocole expérimental de lavage et la CCM 9 2. Elaborer un protocole d’analyse par chromatographie sur couche mince 10 3. Interpréter la CCM et le spectre RMN du proton 11 V. GRILLE D’ÉVALUATION 13

de leur spectre d’absorption. Les pigments porphyrines (chlorophylles ( et ( et les phéophytines) ainsi que les caroténoïdes (carotènes et xantophylles) furent extraits et séparés par chromatographie sur couche mince (TLC), puis solubilisés et leur courbe spectrale fut effectuée. L’ordre d’élution de la chromatographie (Tableau I) présente les pigments les plus polaires en premier avec des ratios moyens (Rf) de 0,1713 pour le premier xanthophylle et 0,3427 pour le deuxième. Par la suite, la chlorophylle