Ampicilline

Fiche réponse Titre : Variabilité génétique bactérienne et résistance aux antibiotiques Intro : Les antibiotiques sont depuis longtemps utilisés pour combattre les bactéries. Nous nous sommes aperçu, au cours du temps, que les bactéries développent une résistance aux antibiotiques, les rendant moins efficace, d’où la campagne : « les antibiotiques, c’est pas automatique !! ». Pour cette raison, et afin de donner le meilleur traitement aux malades, les médecins conseillent de plus en plus

the only thing to affect the zone of inhibition; many factors like agar depth all have distinct effects on the antibiotic. In this practical we will be using the bacteria E.coli, P.aeruginosa & S.aureus and the antibiotics Streptomycin & ampicillin to investigate four factors being tested; (i) Agar depth by pouring out 10, 20, 30 ml of agar into plates, (ii) Inoculum size by growing a diluted and undiluted culture of E.coli, (iii) Cations, through mixing KCl and CaCl2 into the agar, the effects

physiologique stérile (mL) : 1 0 1 1 1 1 1 1 1 1 1 Solution mère d'ampicilline (mL) : 0 1 1 - - - - - - - - Redistribuer du tube précédent (mL) : - - - 1 1 1 1 1 1 1 1* Inoculum (mL) : 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 Concentration finale en ampicilline en g.mL-1 : * : rejeter 1 mL dans l'eau de Javel 3. Conditions d'incubation Les tubes de la gamme doivent être incubés 24 heures à 37°C en atmosphère ordinaire. 4. Réalisation des témoins inoculum  Réaliser une dilution en

d’antibiotique qui tue les bacteries A. Vrai B. Faux 35. La CMI est superieure a la CMB A. Vrai B. Faux 36. Lorsque la CMI est proche de la CMB l’antibiotique est dit bacteriostatique A. Vrai B. Faux 37. Trouvez les betalactamines. A. Tetracycline B. Ampicilline C. Cefaclor D. Azithromycine 38. Les betalactamines A. Agissent au niveau de la paroi B. Agissent sur la synthese de l’ADN C. Sont bactericides D. Sont bacteriostatiques 39. Les macrolides A. Agissent en inhibant la synthese proteique B. Agisse

alors de démarrer. L’expérience Dans cette expérience nous allons utiliser deux plasmides portant des marqueurs de résistances aux antibiotiques différents. Le plasmide récepteur (pUC19) contient le gène de résistance pour l’antibiotique ampicilline. Il sera linéarisé par l'enzyme de restriction BamHI. Le plasmide "donneur" pHP45 porte un fragment contenant le gène codant pour la résistance au chloramphénicol. Il sera coupé en 2 parties par l’enzyme de restriction BamHI libérant ainsi le

puis en contact avec les différents micro-puits du test ; l’ensemble est placé à 37°C pendant 24h. Réalisation de l’antibiogramme: Antibiotique   Famille   Cibles   Spectre   Résistance   naturelle  des   entérobactéries   Ampicilline   Bêta-­‐lactamines   A   Paroi   bactérienne   (transpeptidase)   -­‐  Bacilles  Gram+   -­‐  Certains  bacilles   gram  -­‐     -­‐  Syphilis   (treponema)   -­‐  Bacilles  gram  +   -­‐  Staphylocoques

- Macrolides - Sulfonamides - 0 Nonfluorated q. - Fluorated quinol. - Enquête sur 4 périodes de 3 mois Chez 41513 sujets En France Augmentation des fluoroquinolones > céphalosporines > amoxicillines Baisse des sulfamides > ampicillines > cyclines > quinolones non fluorées Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Cyclines - ß-lactames Famille des ß-lactames - Famille d'AB la plus diversifiée et la plus utilisée - Première ß-lactame découverte par

l’ADN plasmide et purification de l’ADN plasmide Matériaux : 1 aliquot de 15µL d’ADN plasmide stérile (pGFP-actin à 12ng/µL) 200mL de milieu LB stérile à température ambiante (dans un erlenmeyer couvert de papier d’aluminium) 3 pétris gélose LB-ampicilline (50µg/mL) 1 pétri gélose LB 50mL de CaCl2 à 100mM, 4°C Solution saturée de bactéries DH5alpha préparée d’avance par l’instructeur Tampons P1, P2, N3, PB, PE Tampon d’élution TE (10mM Tris – 1mM EDTA) ddH2O Éthanol Culture de bactéries transformées

CH3 O R O COOH N CH3 CH3 H Flucloxacilline FLOXAPEN® R électrocaptant R encombrant 4. Pénicillines à large spectre - Aminopénicilline Amoxicilline CLAMOXYL® NH2 H N S CH3 O HO O N CH3 Ampicilline PENTREXYL® NH2 amoxicilline H N COOH S CH3 O O N CH3 COOH ampicilline - Carboxypénicilline 3 Témocilline NEGARAN® - Acyluréidopénicilline Pipéracilline PIPCIL® O N O N O NH H N S CH3 O O N CH3 COOH pipéracilline

de LB-Agar-ampicilline. Sur l’une nous avons étalé sous hotte 100µl de la suspension bactérienne. La boite est placée au niveau de la cuve. Ensuite nous avons repris notre suspension puis nous l’avons encore centrifugé à 300 g pendant 2 minutes. Le surnageant a été presque entièrement éliminé jusqu’à laisser un tout petit volume dans lequel nous avons remis en suspension le culot bactérien en le pipetant. La suspension a été finalement étalée sur la deuxième boite de LB-Agar-ampicilline. Les deux