Compte rendu :
Différents types de cultures cellulaires Partie 1 :
But :
Le but de ce TP est de réaliser deux types de cultures : une culture primaire de cellules adénohypophysaires de grenouille et une secondaire de neuroblastomes, puis de comparer la prolifération et les caractéristiques de ces deux types de cellules (LA et NG).

Principe :
Une culture cellulaire est le maintien en dehors de l’organisme des cellules non organisées en tissu mais capable de se diviser in vitro et d’exprimer des métabolismes et des fonctions spécifiques.
Les cultures primaires expriment des fonctions spécifiques du tissu d’origine.
Dans ce TP, nous allons étudier les caractéristiques des cultures primaires en utilisant des cultures de cellules adénohypophysaires de grenouille. Pour cela, nous effectuons deux dissections de grenouille afin de récupérer deux lobes antérieurs d’hypophyse.
L’obtention de la culture primaire se fait par dissociation mécanique et par traitement enzymatique (utilisation de protéases et de collagénases) qui vont agir sur les liaisons fortes entre cellules constituant le tissu afin de séparer les cellules entre elles. Il s’agit d’une méthode rapide possédant un bon rendement.
Les suspensions cellulaires obtenues nous permettent de compter le nombre de cellules présentes et de déterminer la teneur en protéine. Après la mise en culture, nous obtenons la culture cellulaire.
Les lignées cellulaires vont dépendre de la réussite de la culture secondaire. La culture secondaire est obtenue par repiquage de la culture primaire.
Lors de ce TP, nous allons étudier les caractéristiques de Neuroblastes hybrides qui correspondent à une lignée tumorale de niveau 1.
Les cultures secondaires des neuroblastomes sont obtenues après un décollement des cellules par éjections répétées, puis un dépôt de suspension cellulaire sur un milieu de culture. Ces cultures nous permettent de compter le nombre de cellules et le déterminer la teneur en protéine.