1 – PRINCIPE : α-amylase hydrolyse le 2-chloro-4-nitrophényl-α-D-maltotrioside (CNPG3) pour libérer le 2-chloro-4-nitrophénol (CNP) et forme le 2-chloro-4-nitrophényl-α-D-maltoside (CNPG2), le maltotriose (G3) et le glucose (G) selon la determination de la réaction : 10 CNPG3 Amylase 9 CNP + 1 CNPG2 + G3 + G

Le taux formé de 2-chloro-4-nitrophénol, mesuré par photométrie, est proportionnel à la concentration catalytique des α-amylase présente dans l'échantillon. Réactif 1

MES Ph 6.0 100 mmol/l CNPG .2.25 mmol/l Chlorure de sodium 350 mmol /l NaCl 350 mmol/l
Acétate de Calcium 6 mmol/l
Thiocyanate de Potassium 900 mmol/l
Azoture de sodium .0.95 g/l

2- Mode operatoire :
Spectrophotomètre ou colorimètre mesure à 450 nm.
Bain thermostatique à 37 ° C
Cuvettes 1,0 cm de trajet optique
Matériel général de laboratoire

3- ECHANTILLONS :

Sérum ou plasma.
Il est recommandé d'utiliser l'héparine comme anticoagulant.

Urine, ajuster le pH à environ 7,0 avant l'entreposage.
Stabilité: 1 mois à 2-8 ° C .

4-MATERIEL :

Spectrophotomètre ou colorimètre mesure à 450 nm.
Bain thermostatique à 37 ° C
Cuvettes 1,0 cm de trajet optique Matériel général de laboratoire

| Serum or plasma | urine | Reactive ( ml ) | 1.0 | 1.0 | echantillon (ul ) | 20 | 10 |

5– CALCUL :

Concentration dans :

Le sérum= ∆A/min x 3954= U/L α- amylase Les urines = ∆A/min x 7908= U/L α- amylase

Pour les urines, il faut tenir compte du taux de dilution et exprimer le résultat /24H

Facteur de conversion : U /L * 0.01667 : ukat /L
6- VALEURS NORMALES :

Sérum ou Plasma de α-Amylase > 90 U/L d α-amylase
Urine > 450 U/L